[发明专利]木瓜中绿原酸的分离方法及应用

说明书

本发明公开了木瓜中绿原酸的分离方法及应用，属于化学食品医药技术领域。本发明方法包括以下步骤：(1)提取：将木瓜破碎，加入含水乙醇提取，过滤，取清液，减压浓缩到20‑25％体积即得木瓜提取浓缩物；(2)分离：将步骤(1)所得木瓜提取浓缩物依次通过AB‑8大孔树脂层析柱、DEAE离子交换层析、Toyopearl HW‑40层析柱、ODS‑AQ层析柱进行洗脱，得绿原酸。本发明首次从木瓜中提取分离到绿原酸，收率为81.36％，纯度为97.12％。本发明还确定绿原酸为木瓜中抗炎、抗菌作用的主要功效成分，为制备抗炎、抗菌的药物和功能食品提供一种新途径。

技术领域

本发明涉及木瓜中绿原酸的分离方法及应用，属于化学食品医药技术领域。

背景技术

木瓜，蔷薇科植物贴梗海棠属的果实(Chaenomeles speciasa(sweet)Nakai)，属药食同源材料，具有除湿利痹、舒筋活络、驱风活血的作用，药理学研究证明木瓜具有抗炎、镇痛、抗菌、抗氧化作用。木瓜所含有机酸种类繁多，其中以苹果酸和柠檬酸含量较高，其他有机酸类成分还有酒石酸、熊果酸和齐墩果酸等。目前普遍认为总有机酸有较好的抗炎镇痛作用，但缺少相应的研究数据，并且也不知道具体哪种有机酸起抗炎镇作用。

发明内容

本发明首次从木瓜中提取分离到绿原酸，并确定绿原酸为木瓜中抗炎、抗菌作用的主要功效成分。

本发明采用含水乙醇提取，多种层析分离，从木瓜中提取分离到绿原酸，并发现其具有抗炎、抗菌的功效。

本发明的第一个目的是提供一种从木瓜中分离提取制备绿原酸的方法包括以下步骤：

(1)提取：将木瓜破碎，加入含水乙醇提取，过滤，取清液，减压浓缩，即得木瓜提取浓缩物。

(2)分离：将所得木瓜提取浓缩物依次通过AB-8大孔树脂层析柱、DEAE离子交换层析、Toyopearl HW-40层析柱、ODS-AQ层析柱进行洗脱，得绿原酸。

在本发明一种实施方式中，所述绿原酸的结构式为：

在本发明一种实施方式中，步骤(1)中，含水乙醇为体积分数为0-50％的乙醇水溶液。

在本发明一种实施方式中，步骤(1)中，木瓜与含水乙醇的质量体积比为1kg∶(3～8)L。具体可选1kg：4L。

在本发明一种实施方式中，步骤(1)中，提取的温度为40～60℃；具体可选50℃。

在本发明一种实施方式中，步骤(1)中，提取的时间为3～5h。

在本发明一种实施方式中，步骤(1)中，减压浓缩到20～-25％体积分数。

在本发明一种实施方式中，步骤(1)具体包括如下过程：

将木瓜带皮破碎成直径小于5毫米的小块，加入0-50％含水乙醇，50℃温度下搅拌提取3小时，过滤，取清液，提取二次，合并滤液，减压浓缩到20-25％体积即得木瓜提取浓缩物。

在本发明一种实施方式中，步骤(2)中包括如下过程：

将木瓜提取浓缩物上AB-8大孔树脂层析柱，依次用去离子水、10％、20％、30％，50％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集20％的乙醇水溶液洗脱部分，减压浓缩后上样到DEAE离子交换层析柱，依次用去离子水、0.05、0.1、0.15mol/L的NaCl水溶液进行梯度洗脱，收集0.10mol/L的NaCl水溶液洗脱部分，减压浓缩后上样到Toyopearl HW-40层析柱，先用水洗脱，再用10％的乙醇水溶液洗脱，收集10％乙醇洗脱部分，去溶剂后上样到ODS-AQ层析柱，再依次用去离子水、体积分数为5％、10％、15％的乙醇进行梯度洗脱，收集10％的乙醇洗脱部分，浓缩、干燥，得到绿原酸产物。