[发明专利]一种重组杆状病毒及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 202310050168.2 | 申请日： | 2023-02-01 |
| 公开（公告）号： | CN116064621A | 公开（公告）日： | 2023-05-05 |
| 发明（设计）人： | 付月君;王欢;王伟;王软林;宋莉 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | C12N15/62 | 分类号： | C12N15/62;C12N7/01;C12N15/866;A01N63/40;A01P7/04;C12R1/93 |
| 代理公司： | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人： | 张福增 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 杆状病毒 及其 构建 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种gp64TMdouble-egfp基因，其特征在于序列为SEQ ID No.1。
2.一种重组杆状病毒，其特征在于通过转座重组Bac-to-Bac系统将权利要求1所述的gp64TMdouble-egfp基因整合到苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcMNPV基因组中获得。
3.如权利要求2所述的重组杆状病毒的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：
a)以AcMNPV基因组为模板，扩增gp64基因；
b)以gp64基因为模板，通过PCR方法将其中编码跨膜结构域transmembrane domain,TM的序列加倍后获得gp64TMdouble；
c)构建含有gp64TMdouble基因和增强型绿色荧光蛋白egfp基因的重组质粒pFastBacDual-gp64TMdouble-egfp；
d)将重组质粒pFastBacDual-gp64TMdouble-egfp转化到DH10B感受态细胞，获得重组杆粒Bacmid-gp64TMdouble-egfp；
e)将重组杆粒Bacmid-gp64TMdouble-egfp转染草地贪夜蛾Sf9细胞，获得重组杆状病毒AcMNPV-gp64TMdouble-egfp。
4.如权利要求2所述的重组杆状病毒用于制备防治草地贪夜蛾幼虫的微生物杀虫剂。
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