[发明专利]RBX1在制备抑制未分化甲状腺癌转移药物中的应用

说明书

本发明涉及一种RBX1在制备抑制未分化甲状腺癌转移药物中的应用，并具体公开了抑制未分化甲状腺癌转移的RBX1的下调剂。本发明通过临床研究表明了RBX1参与调控未分化甲状腺癌肿瘤细胞的转移和迁移以及RBX1的细胞内信号调节机制，为RBX1在细胞适应代谢应激中的作用提供了线索。

技术领域

本发明属于生物制药技术领域，具体为一种RBX1在制备抑制未分化甲状腺癌转移药物中的应用。

背景内容

甲状腺癌是一种高度流行的癌症。乳头状甲状腺癌（PTC）占所有甲状腺癌病例的85%；可固化90%以上。与之形成鲜明对比的是，未分化甲状腺癌（ATC）是最恶性的甲状腺癌，约占甲状腺癌死亡率的40%。与PTC或其他甲状腺癌不同，ATC生长迅速，侵袭性强。阐明其进展和转移的机制对治疗学的发展具有重要意义。

细胞代谢的重新编程是癌细胞的一个关键特征。有氧糖酵解，也称为沃堡效应，在多种癌症的生长中起着重要作用，包括乳腺癌、肝癌、非小细胞肺癌、膀胱癌和甲状腺癌。丙酮酸激酶是一种限速糖酵解酶，可促进磷酸烯醇式丙酮酸转化为丙酮酸。它有四种亚型：PKL（丙酮酸激酶肝）、PKR（丙酮酸激酶红细胞）、PKM1（丙酮酸激酶M1型）和PKM2（丙酮酸激酶M2型）。最近的报告强调了PKM2在多种癌症的致癌、有氧糖酵解和转移中的作用。众所周知，PKM，特别是PKM2，在某些癌症中过度表达。例如，PKM2在40%以上的急性白血病患者中过度表达，并与不良治疗结果相关。在胃癌中，PKM2过表达与预后相关，表明其可能用作预后生物标志物。通过抑制PKM2和增强PDC活性，癌症代谢已被重新编程，这增加了对几种癌症的抗癌效果。同时，许多研究表明，癌细胞通过调节PKM选择性剪接来促进PKM2的表达，从而达到正常细胞的代谢边缘；因此，靶向这种选择性剪接被证明是消除癌细胞的有效策略。因此，确定PKM替代剪接的潜在因素和机制，促进PKM2介导的Warburg效应，对于克服当前癌症治疗的挑战至关重要。

泛素和泛素样蛋白对蛋白质的修饰是细胞生理学中涉及的主要翻译后调节机制。Skp1/Cullin/F-box（SCF）复合物是最大的E3泛素连接酶和广泛泛素化蛋白。RBX1首先从酵母中分离和纯化，作为人和酵母SCF复合物的必需成分。越来越多的证据表明，RBX1的表达促进了许多癌症类型的肿瘤进展和转移，包括乳腺癌、肝癌、非小细胞肺癌、膀胱癌和卵巢癌。最近，研究表明RBX1是癌症中泛素蛋白酶体系统（UPS）的关键调节因子。由于其E3泛素连接酶活性，RBX1有助于目标蛋白的泛素化，并标记其降解。然而，它在ATC进展和潜在信号级联中的确切作用仍不清楚。

迄今为止，关于RBX1是否调控未分化甲状腺癌肿瘤细胞的转移和迁移以及RBX1的细胞内信号调节机制，并没有报道。

发明内容

本发明的目的在于为了解决如上问题，而提供一种抑制肿瘤转移的方法和试剂。

本发明的第一方面，提供了一种RBX1的下调剂，所述RBX1下调剂能够在蛋白或基因水平上下调RBX1的表达或活性；

所述RBX1的下调剂选自：核酸抑制物（如干扰分子）、蛋白抑制剂、蛋白水解酶以及蛋白结合分子（如抗体或配体）中的一种。

优选的，所述RBX1的下调剂为：以RBX1基因或其转录本为靶序列、且能够抑制RBX1基因表达或基因转录的干扰分子；

所述RBX1的下调剂为：shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸，或者能表达或形成所述shRNA、小干扰RNA、dsRNA、微小RNA、反义核酸的构建物，或特异性与RBX1蛋白结合的结合分子（如能够抑制RBX1蛋白活性的抗体或配体）。

优选的，所述RBX1的下调剂具有以下shRNA结构：Seq正向-X-Seq反向；

其中，Seq正向的核苷酸序列具有SEQIDNO:1或SEQIDNO:2所示序列；

Seq反向为与Seq正向完全互补或者非完全互补的序列，非完全互补（包括基本上互补的情形）可以存在部分错配或者突起；