[发明专利]一种果汁基因组DNA快速提取试剂盒

说明书

本发明涉及一种果汁基因组DNA提取试剂盒，所述试剂盒包括DNA裂解液、DNA清洗液1、DNA清洗液2和圆形滤纸片，所述DNA裂解液包括盐酸胍、聚乙烯吡咯烷酮、Tris‑HCl、EDTA和Triton‑X‑100，所述DNA清洗液1包括盐酸胍和Tris‑HCl，所述DNA清洗液2包括Tris‑HCl和NaCl。本发明的果汁基因组DNA提取试剂盒具有提取时间短、成本低、通用性强、安全性和环保性高等特点，为实现果汁现场快速真伪鉴别提供了技术支撑。

技术领域

本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种果汁基因组DNA快速提取试剂盒。

背景技术

果汁是以水果为原料，采用物理方法制成的可发酵但未发酵的汁液、浆液制品，或在浓缩果汁中加入其加工过程中除去的等量水分还原制成的汁液、浆液制品。果汁中富含维生素、矿物质、糖分、膳食纤维等，具有促消化、润肠道、预防肿瘤多种优点，出于对果汁营养价值的考虑，年轻一代果汁需求量越来越大。预计到2023年，果汁销量将达到368098亿升。随着全球贸易的发展，在经济利益的驱动下，国际市场上高达80％的果汁存在掺假问题。为保护消费者权益，维护果汁市场秩序，建立快速、准确的鉴别方法势在必行。

基于DNA的分子生物学技术不受原料产地、环境、加工方式等外在因素的影响，可对果汁产品中水果成分的种、属进行鉴定，具有灵敏度高、特异性强、简便快捷等优点。但果汁中含有大量的碳水化合物和次生物质(色素、酚类以及果胶等)会对DNA提取以及PCR扩增造成干扰和抑制作用。另外，DNA提取过程中某些残留杂质的基质效应也会影响后续的分子操作。因此高效、快速的DNA提取方法的建立是应用分子生物学技术进行果汁现场、快速鉴伪的关键步骤。

关于基因组DNA的快速提取已有相关学者应用碱解法、磁珠法、纤维素膜片吸附法、滤纸法、棉签法、硅胶膜离心柱法、磁性纳米微球法等方法展开对菠菜、大白菜、肉制品、黄瓜、中药材、植物叶片、黄秋葵、玉米干种子等样品的基因组DNA快速提取研究。但是目前尚未有开展针对果汁基因组DNA快速提取的相关研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种果汁基因组DNA快速提取试剂盒及对应的快速提取方法，本发明的试剂盒具有提取时间短、成本低、通用性强、环保的特点，为实现果汁现场快速真伪鉴别提供技术支撑。

为实现上述发明目的，本发明第一方面提供了一种果汁基因组DNA提取试剂盒，所述试剂盒包括DNA裂解液、DNA清洗液1、DNA清洗液2和圆形滤纸片，所述DNA裂解液包括盐酸胍、聚乙烯吡咯烷酮、Tris-HCl、EDTA和Triton-X-100，所述DNA清洗液1包括盐酸胍和Tris-HCl，所述DNA清洗液2包括Tris-HCl和NaCl。

优选的，所述DNA裂解液包括1-15M盐酸胍、0.2-5％聚乙烯吡咯烷酮(重量百分比)、30-80mM Tris-HCl、5-50mM EDTA和5-50mM Triton-X-100。

更优选的，所述DNA裂解液包括6-10M盐酸胍、0.5-2％聚乙烯吡咯烷酮(重量百分比)、40-60mM Tris-HCl、10-30mM EDTA和10-30mM Triton-X-100。

进一步优选的，所述DNA裂解液包括8M盐酸胍、1％聚乙烯吡咯烷酮(重量百分比)、50mM Tris-HCl、20mM EDTA和21.3mM Triton-X-100。

优选的，所述聚乙烯吡咯烷酮为PVP-40。

优选的，所述DNA清洗液1包括1-15M盐酸胍和30-80mM Tris-HCl。

更优选的，所述DNA清洗液1包括6-10M盐酸胍和40-60mM Tris-HCl。

进一步优选的，所述DNA清洗液1包括8-10M盐酸胍和50-60mM Tris-HCl。