[发明专利]一种快速检测尿液中HP抗体分型的试剂条及包含其的试剂盒

说明书

本发明涉及医学检验技术领域，具体涉及一种快速检测尿液中HP抗体分型的试剂条及包含其的试剂盒。该试纸条金标垫上固化有胶体金标记的抗人IgG兔多克隆抗体，层析膜包括从靠近样品垫端至靠近吸水垫端依次平行设置、且相互间隔的T1检测线、T2检测线和质控线，T1检测线包被有重组HP CagA+VacA融合抗原，T2检测线包被有天然HP尿素酶，质控线包被有羊抗兔IgG抗体；重组HP CagA+VacA融合抗原对应的CagA的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示，VacA的蛋白质序列如SEQ ID NO:4所示，该试纸条能同时检测尿液中的尿素酶、CagA和VacA幽门螺杆菌抗体，并且检测结果与UBT检测方法的一致性能达到97％以上。

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，具体涉及一种快速检测尿液中HP抗体分型的试剂条及包含其的试剂盒。

背景技术

幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori，Hp)是一种定植在人体胃部的革兰氏阴性致病菌。Warren和Marshall等人通过吞服Hp证实该菌可以在胃部持续定植引起胃炎，进一步的大量研证实Hp可以引起一系列胃肠道疾病，包括慢性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤以及胃癌。Hp在人群中平均感染率为50％，但在不同地域之间差异很大。发展中国家感染率超过80％，而发达国家低于40％。目前公认的Hp传播方式主要是儿童时期通过家庭成员之间的密切接触传播。一旦建立感染，在不进行根除治疗的情况下，可终生带菌，无法产生具有中和作用的抗体实现自身清除。

精准的检测技术是根除幽门螺杆菌的基础，尽管传统检测技术众多，但都在敏感性与特异性等诸多方面存在不足，在这些检测技术指导下的用药方案也导致诸多问题，如国内外研究均表明，近年来幽门螺杆菌的耐药率明显增加，且有产生多重耐药的趋势。因此，开发特异、敏感且便捷检测方式对公共健康安全具有重要意义。幽门螺杆菌的检测技术主要包括尿素呼气试验、快速尿素酶试验、血清学检查、聚合酶链式反应、内镜检查、组织学检查。

尿素呼气试验检测技术虽然简便、无创，但是设备仪器昂贵，大量医疗机构不具备检测的条件，同时同位素对孕妇和幼儿有害，不利于针对孕妇和儿童的筛查，此外，该方法仅能检测人是否感染了幽门螺杆菌，不能针对幽门螺杆菌进行分型，因此不利于此后确定针对性的诊疗方案。

快速尿素酶试验检测技术需要在做胃镜时取胃部组织，然后根据试纸颜色变化来确定病人是否感染幽门螺杆菌。此方法因需要通过胃镜取组织，因此需要病人的配合度很高，不利于针对儿童以及配合性差的病人进行筛查，同时快速尿素酶试验可能会因多种因素产生假阳性，因此此方法不能用于病人的疗效评估。

内镜检查的局限性在于费用昂贵、会产生不适感，且有并发症风险，如腹胀腹痛、呕吐口臭和烧心等，诊断结果对内镜医生经验及能力的依赖性较高，因此内窥镜检测目前基本不作为幽门螺杆菌确诊的手段。

组织学检查是通过特殊染色技术对胃活检进行分析，通常被认为是直接检测幽门螺杆菌感染的“金标准”。由于幽门螺杆菌在整个胃中的分布和密度不同，为提高组织学检测的准确性，通常从胃窦和胃体两个部位获取标本，标本数量不少于两个且需进行多次活检。组织学检查亦受到胃活检的部位、数量、大小和染色方法，操作人员经验水平、抗生素及质子泵抑制剂等影响。并且此方法通常需要联合快速尿素酶检测或血清学检测来对病人做出诊断。

聚合酶链式反应(PCR)检测，具有更高的灵敏度和特异性，达95％以上，尤其针对有出血症状的患者。检测样本包括胃活检组织、血液、唾液、粪便等。PCR检测方法快速、经济且自动化程度高，不受质子抑制剂、铋剂和抗生素等药物的影响，且能对特定位点的耐药基因的突变进行检测，在幽门螺杆菌耐药情况愈发严重的形势下，具有明显优势，但由于死亡菌体DNA片段的存在或与某些细菌存在共同基因，可能造成假阳性，并且需要专门的设备及人员，成本也较高。