[发明专利]一种非交联活性胶原基质颗粒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：

第一步：取皮裁切

取动物的表皮并对其进行裁切，将裁切后的所述表皮放在消毒液内浸泡消毒10至30min，再用水清洗消毒后的所述表皮，将经清洗的所述表皮在-15至20℃的温度下反复冻融，并将经最后一次解冻的所述表皮放置在2至8℃的温度下预冷备用，得备用皮片；

第二步：无害化处理

将所述备用皮片放置在温度为20至28℃、转速为30至60rpm的处理液中振荡10至120min，得第一混合物；

向所述第一混合物内加入纯化水并在温度为15至28℃、转速为30至60rpm的条件下振荡4至12h，得第二混合物；

将所述第二混合物放入冷盐水中浸泡4至6h，得非交联活性胶原基质；

第三步：洗脱纯化

用低渗溶液和高渗溶液交替对所述非交联活性胶原基质进行洗脱处理，得脱细胞非交联活性胶原基质；

将所述脱细胞非交联活性胶原基质放置在0.85％氯化钠溶液中保持30min，再将所述脱细胞非交联活性胶原基质放置2至8℃的温度下保存；

第四步：干燥

将所述脱细胞非交联活性胶原基质放置在预冻液中浸泡10至60min，得预冻非交联活性胶原基质块，对所述预冻非交联活性胶原基质块进行裁切和断裂处理，得脱细胞非交联活性胶原基质块；

将所述脱细胞非交联活性胶原基质块进行冷冻干燥处理，得冻干非交联活性胶原基质块；

第五步：粉碎

将所述冻干非交联活性胶原基质块放置在液氮内处理10至30min，将经液氮处理后的所述冻干非交联活性胶原基质块放置在均质装置上处理，得非交联活性胶原基质颗粒；

第六步：灭菌

用γ射线或含有防腐剂的质量分数为0.9％的生理盐水溶液对所述非交联活性胶原基质颗粒进行灭菌处理。

2.根据权利要求1所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述消毒液为质量分数为5％的新洁尔灭或质量分数为0.5％的洗必泰溶液。

3.根据权利要求2所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述备用皮片的厚度为0.5至1.5mm。

4.根据权利要求3所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述处理液为离子型溶液或非离子型溶液，所述离子型溶液为Tris-HCl溶液、EDTA-甘油复合溶液或脱氧胆酸钠中的一种，所述非离子型溶液为Triton-100或酶中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述第二混合物和所述冷盐水的添加配方为1kg的第二混合物中加入2至5L的冷盐水。

6.根据权利要求1所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述低渗溶液为质量分数为10mM、pH为7至8的Tris-HCl溶液或质量分数为0.3至0.45％的氯化钠溶液，所述高渗溶液为质量分数为1至20％的氯化钠溶液。

7.根据权利要求1所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述预冻液包括质量分数为2.5至10％的葡聚糖或右旋糖苷、质量分数为1至10％的蔗糖、质量分数为7.5％的聚乙烯吡啶烷酮和质量分数为0.5至6％的Hank^，s溶液。

8.根据权利要求1所述的一种非交联活性胶原基质颗粒的制备方法，其特征在于，所述γ射线的辐射剂量为7至25KGy，所述防腐剂为叠氮钠、尼泊金酯类、醇类或辛酰羟肟酸中的一种，所述醇类为丙二醇、丁二醇或己二醇中的一种或多种。

9.一种权利要求1-8任一项所述制备方法制得的非交联活性胶原基质颗粒，其特征在于，所述非交联活性胶原基质颗粒的粒径为20至1500μm。

10.一种权利要求1-8任一项所述制备方法制得的非交联活性胶原基质颗粒用于抗菌、止血或生物修复的应用。