[发明专利]LCAT基因、纯化蛋白在制备预防、缓解和/或治疗原发性肝细胞癌的药物中的应用

说明书

本发明公开了一种LCAT基因、纯化蛋白在制备预防、缓解和/或治疗原发性肝细胞癌的药物中的应用，涉及生物医药技术领域。利用睡美人转座子系统在小鼠肝细胞过表达LCAT基因，证实体内LCAT基因肝脏过表达有效减缓小鼠原发性肝细胞癌进展。肝癌细胞系LCAT基因低表达得到与体内实验一致结果；进一步证实LCAT基因抑制肝细胞癌细胞增殖是依赖于其分泌功能。裸鼠皮下注射HCCLM9肝癌细胞异体成瘤，发现LCAT纯化蛋白瘤内注射可以显著抑制体内肝癌细胞的增殖。本发明首次从体内证实肝细胞LCAT基因表达水平与原发性肝细胞癌的恶性增殖过程直接相关，并且LCAT基因过表达抑制肝癌细胞增殖依赖其分泌蛋白特性；而LCAT纯化蛋白可以成为干预原发性肝细胞癌的有效工具和重要研究靶点。

技术领域

本发明基因的功能与应用领域，具体涉及一种LCAT基因、纯化蛋白在制备预防、缓解和/或治疗原发性肝细胞癌的药物中的应用。

背景技术

截止2020年，原发性肝细胞癌是全球发病率第六的癌症，其造成死亡数量在癌症造成死亡中排名第三；每年新增病例约906000例，造成死亡830000人。病毒感染、酗酒、非酒精性脂肪肝和遗传因素是原发性肝细胞癌的重要危险因素，但这些危险因素尚未被转化为有效的治疗靶点。而晚期原发性肝细胞癌的治疗药物通常效果有限，如多激酶的抑制剂如索拉菲尼和仑法替尼。因此，高发病率高致病性的特点，结合目前临床上缺乏有效的治疗手段，原发性肝细胞癌亟需发展出更加有效的预防、缓解和/或治疗靶点。

卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(phosphatidylcholine-sterol acyltransferase，LCAT)是由主要由肝脏和小肠合成释放入血液，以游离或与脂蛋白结合的形式存在，在血浆中起催化作用的酶，其作用是将高密度脂蛋白的卵磷脂的C2位不饱和脂肪酸转移给游离胆固醇，生成溶血卵磷脂和胆固醇酯。血浆胆固醇几乎70％-80％是胆固醇酯，均是LCAT蛋白催化生成所致。LCAT基因缺陷会导致脂质在人体内的异位堆积，并最终降低患者的寿命。有证据提示，LCAT基因转录水平可以作为良好的肝癌恶性评估指标。但目前缺少直接在体内验证LCAT表达水平与肝癌进展的直接证据，而细胞水平实验并不能简单替代肝脏内复杂的病变情况。因此尚未见根本性证据，去证实肿瘤发生过程中LCAT基因表达水平与原发性肝细胞癌进展程度的关系以及LCAT基因作为肝细胞癌药物研发靶点的潜力。

发明内容

为解决现有治疗手段的缺陷和不足，本发明通过构建肝脏LCAT基因过表达小鼠及体外细胞生物学实验，首次于体内证实肝脏LCAT基因表达水平与原发性肝细胞癌进展的关系，并且LCAT蛋白抑制原发性肝细胞癌增殖是依赖其分泌能力。裸鼠皮下成瘤后，瘤内注射LCAT纯化蛋白可以有效抑制皮下成瘤的增殖。提供LCAT纯化蛋白用于缓解原发性肝细胞癌的新用途。本发明首次在动物体内证实肝脏LCAT基因表达与原发性肝细胞癌发展程度的关系，并且纯化LCAT蛋白可以抑制原发性肝细胞癌的增殖，为原发性肝细胞癌及相关疾病的预防和/或治疗找出新的分子靶点。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

第一方面，本发明提供一种LCAT基因作为药物靶标在制备预防、缓解和/或治疗原发性肝细胞癌的药物中的应用。

作为优选方案，所述药物是在体内提高肝细胞LCAT基因表达的化学药物和生物分子，实现抑制肝癌细胞的增殖、迁移或侵袭。

第二方面，本发明提供一种LCAT纯化蛋白在制备预防、缓解和/或治疗原发性肝细胞癌的药物中的应用，其特征在于：

LCAT全长蛋白及LCAT蛋白结构域的外源表达载体作为药物靶标以预防和/或缓解原发性肝细胞癌；或者，

LCAT蛋白激动剂作为药物靶标以预防和/或缓解原发性肝细胞癌。

作为优选方案，所述外源表达载体，包括以DNA、RNA及病毒表达载体实现LCAT全长蛋白及LCAT蛋白结构域表达的外源表达载体，最终导致在体内抑制肝癌细胞的增殖、迁移或侵袭。