[发明专利]一种丝素蛋白颗粒的制备方法

说明书

本发明公开了一种丝素蛋白颗粒的制备方法，属于生物医药技术领域。本发明通过SP与PVA物理混合，二者之间发生相分散，制备出粒径大小均一、粒径尺寸可调的丝素蛋白颗粒。本发明提供的丝素蛋白球制备方法，极大地提高了产品粒径的均一性，同时缩短制备周期，且制备过程中无有毒有机溶剂参与。因此，产品可作为化妆品辅料、医疗器械原料等广泛应用于医疗、精细化工品行业，尤其作为药物和生物制剂载体，在药物递送及疾病诊疗领域具有非常可观的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种丝素蛋白颗粒的制备方法。

背景技术

近年来，为了优化小分子药物以及蛋白质和生物酶等生物制剂的治疗效果，许多以纳米材料为基础的药物递送系统得以开发并利用。这些药物递送系统不仅提高了药物的生物利用度、减少毒副作用，还能实现药物的靶向释放和控制释放。进一步提高药物递送系统的生物安全性，降低其炎症反应和免疫原反应，开发价格低廉、重复性高且易于生产、易于临床转化的纳米载体具有重大意义。

然而，目前丝素蛋白(Silk Fibroin,SF)微纳米材料的制备过程多涉及有机溶剂，如丙酮、环己烷等，会为丝基生物材料带来不必要的生物毒性；此外，为保证丝基药物递送系统以及医疗器械和敷料在生物降解程度以及机械强度等的一致性和稳定性，丝素蛋白微纳米材料粒径的均一性和可调节性显得尤为重要。丝素蛋白微纳米材料的形成与其丝素蛋白分子的亲疏水性质密切相关，而外界环境的变化会给丝素蛋白分子的亲疏水性带来巨大影响。因此，如何制备出粒径均一且可调节的丝素蛋白微纳米颗粒一直是个难点。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提出了一种丝素蛋白颗粒的制备方法来制备产品具有高度均一的粒径分布、大范围的粒径调节尺度、高生物安全性的丝素蛋白颗粒。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种丝素蛋白颗粒的制备方法，包括以下步骤：

将SF溶液与PVA溶液混合并进行超声处理，其中SF溶液与PVA溶液的质量浓度比例为1:2至1:25；超声结束后，将SF溶液与PVA溶液的混合溶液置于容器中，利用烘箱烘干水分，得到SF和PVA形成的薄膜；

将薄膜转移至离心管中，加水溶解薄膜，通过离心分离获得丝素蛋白颗粒沉淀，弃去上清，水洗沉淀3～5次，进行冷冻干燥得到粒径均一的丝素蛋白颗粒。SF分子在PVA溶液中，因SF与PVA分子间氢键和亲疏水相互作用以及SF分子内氢键作用强弱发生不同程度的自聚，形成粒径均一可调的丝素蛋白颗粒。上述SF为丝素蛋白(Silk Fibroin)，PVA为聚乙烯醇(Polyvinyl alcohol)。

在一些实施例中，SF溶液通过天然蚕茧进行制备，制备方式为：将天然蚕茧除蛹后，进行脱胶、溶解、透析处理，最终获得SF溶液。

在一些实施例中，所述SF溶液与PVA溶液的体积比为1:4。

在一些实施例中，所述SF溶液的质量浓度为0.1wt％～5wt％。

在一些实施例中，所述PVA溶液的质量浓度为1.25wt％～10.0wt％。

在一些实施例中，所述超声处理的条件为超声能量为800瓦(W)、频率为40千赫兹(kHz)、时间为30分钟(min)。

在一些实施例中，所述离心分离的温度为25摄氏度、转速为11000转/分钟(rpm)、时间为20min。

在一些实施例中，所述烘箱的烘干温度为37～60摄氏度(℃)、烘干时间为6小时(h)。

在一些实施例中，所述SF溶液的质量浓度为0.05～0.1wt％，通过上述方式进行制备可得到纳米级丝素蛋白颗粒，粒径范围为320.59±14.81～360.55±3.65nm，其中最佳PDI＝0.04。