[发明专利]一种分离制备高纯度芒柄花苷的方法

说明书

本发明提供一种高纯度芒柄花苷的分离制备方法，包括如下的步骤：S1：将黄芪粉碎，再加入水进行回流提取；S2：弃去上清液，在残渣中加入乙醇溶液，加热回流提取，得到黄芪提取物浸膏；S3:取黄芪提取物浸膏过大孔吸附树脂，得到纯度大于50％的芒柄花苷样品；S4:取上述纯度大于50％的芒柄花苷样品进行逆流色谱分离纯化，得到纯度大于95％的芒柄花苷样品；S5：取上述芒柄花苷样品进行重结晶，得到纯度大于98.5％的芒柄花苷标准样品。本发明方法中所用的提取溶剂为乙醇、无毒，逆流色谱分离过程无死吸附、制备量大，且可以通过重复重叠进样节约制备溶剂及时间。本发明的方法步骤简单、制备成本低，且可实现芒柄花苷标准样品的规模化制备。

技术领域

本发明属于天然产物分离技术领域，具体涉及一种高纯度芒柄花苷的分离制备方法。

背景技术

黄芪(Astragalus membranaceus(Fisch.)Bunge.)为豆科黄芪属多年生草本，产于内蒙古、山西、甘肃、黑龙江等地，生于林缘、灌丛或疏林下，亦见于山坡草地或草甸中。黄芪具有补中益气、止汗、利水消肿、除毒生肌等作用。药理学研究表明，芒柄花苷是黄芪中重要活性成分，具有神经保护和抗氧化等作用。虽然目前国内外市场已有芒柄花苷对照品的生产和销售公司，但市场缺乏芒柄花苷标准样品，产品质量良莠不齐。因此，亟待研制芒柄花苷标准样品，保证以此为原料的食品、功能食品、保健品及化妆品的质量。同时，黄芪相关检测标准的制定也是基于其指标成分的标准样品的研制，因此，芒柄花苷标准样品的研制意义重大。

公开号为CN109180759A的中国发明专利“一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法”(CN201811241989.X)中公开了一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法，主要涉及的方法是溶剂回流提取、硅胶柱分离及重结晶的方法，得到纯度大于92％的芒柄花苷样品。但在该方法中使用了四氢呋喃试剂，该试剂具有刺激和麻醉作用，人体吸入后会引起上呼吸道刺激、恶心、头晕、头疼和中枢神经系统抑制，能引起肝、肾损害。因此，对于长期从事分离制备的工人而言，该提取工艺有待进一步改善。另外，作为标准的建立，92％纯度的芒柄花苷样品远远达不到要求，亟需研制更高纯度的芒柄花苷样品以建立相关检测标准。

此外，标准样品的提取原料也格外重要。芒柄花苷作为黄芪的主要指标成分，为了控制黄芪及相关产品的质量，使用从黄芪中提取分离的芒柄花苷标准样品更有说服力。

发明内容

本发明的目的是提供一种高纯度芒柄花苷的分离制备方法，所提供的方法步骤简单、制备成本低，且可实现芒柄花苷标准样品的规模化制备。

本发明所提供的高纯度芒柄花苷分离制备方法，包括如下的步骤：

S1：将黄芪粉碎，再加入水进行回流提取；

作为优选条件，其中黄芪和水的料液比为1:8～1:12，水回流提取时间为0.5～1h；

S2：弃去上清液，在残渣中加入乙醇溶液，加热回流提取，得到黄芪提取物浸膏；

其中残渣和乙醇的料液比为1:8～1:12，乙醇浓度为60％～90％，回流提取时间为1～5h；

S3:取黄芪提取物浸膏过大孔吸附树脂，得到纯度大于50％的芒柄花苷样品；

所述大孔吸附树脂为苯乙烯基质交联的中等极性的共聚体，解析溶剂为60％～85％的乙醇溶液；

S4:取上述纯度大于50％的芒柄花苷样品进行逆流色谱分离纯化，得到纯度大于95％的芒柄花苷样品；

所述逆流色谱溶剂系统中正丁醇:乙酸乙酯:甲醇:水的体积比为2:8:1-9:1-9，检测波长为254nm；

作为优选，所述的逆流色谱溶剂系统中正丁醇:乙酸乙酯:甲醇:水的体积比为2:8:3:7；