[发明专利]一株降解黄曲霉毒素菌株的筛选方法在审
| 申请号： | 202211291053.4 | 申请日： | 2022-10-21 |
| 公开（公告）号： | CN115975859A | 公开（公告）日： | 2023-04-18 |
| 发明（设计）人： | 马杰;谭碧娥;周苗;尹杰;黄珂 | 申请（专利权）人： | 湖南农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N1/02;C12Q1/04;C12Q1/689;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京和联顺知识产权代理有限公司 11621 | 代理人： | 孙伟新 |
| 地址： | 410128 *** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 降解 黄曲霉 毒素 菌株 筛选 方法 | ||
1.一株降解黄曲霉毒素菌株，其特征在于，所述黄曲霉毒素降解菌为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)，已于2022年08月29日保藏于中国典型培养物保藏中心(武汉)，保藏号为：CCTCC NO:M20221340。
2.根据权利要求1所述的一株降解黄曲霉毒素菌株的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：培养基的制备，包括种子培养基、初筛培养基和发酵培养基的制备；
步骤2：从环境中取腐殖土、枯叶和枯木等样品加生理盐水稀释并摇匀，静止5分钟后吸取上清液于种子培养基中，在37℃下，恒温箱中培养72小时，观察浑浊情况；
步骤3：吸取菌液于初筛培养基上，在37℃下，恒温箱中培养1周，待长出菌落后接种于种子培养基中，在37℃下，恒温箱中培养72小时，观察浑浊情况；
步骤4：将菌液涂板于初筛培养基上，再将上述步骤3和4重复操作3次，保存能以香豆素为碳源生长的菌株进行复筛选；
步骤5：将初筛菌株在发酵培养基中37℃培养72小时，测定黄曲霉毒素降解率；
步骤6：选择降解率最高菌株16S rDNA测序进行菌种鉴定。
3.根据权利要求2所述的一株降解黄曲霉毒素菌株的筛选方法，其特征在于，所述步骤1中种子培养基为营养肉汤(pH7.0)。
4.根据权利要求2所述的一株降解黄曲霉毒素菌株的筛选方法，其特征在于，所述步骤1中初筛培养基为:KH2 PO4 0.25，MgSO4·7H2O0.25，KNO3 0.5，(NH4)2SO4 0.5，CaCl2·2H2O0.005，FeCl3·6H2O0.003，琼脂18，香豆素1.0，pH7.0；121℃高压灭菌20min后加入香豆素。
5.根据权利要求2所述的一株降解黄曲霉毒素菌株的筛选方法，其特征在于，所述步骤1中发酵培养基为牛肉膏3，蛋白胨10，NaCl8.5，KH2PO4，葡萄糖1，pH6.5；121℃高压灭菌20min。
6.根据权利要求2所述的一株降解黄曲霉毒素菌株的筛选方法，其特征在于，所述步骤2中腐殖土、枯叶和枯木等样品按照1：9加生理盐水。
7.根据权利要求2所述的一株降解黄曲霉毒素菌株的筛选方法，其特征在于，所述步骤5中发酵培养基中黄曲霉毒素的浓度为2.5μg/mL。
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