[发明专利]一种从GST融合蛋白酶切后的产物中纯化无GST标签的目的蛋白的方法和产品

说明书

本发明公开了一种从GST融合蛋白酶切后的产物中纯化无GST标签的目的蛋白的方法和产品，涉及生物技术领域。该方法通过使用抗GST单克隆抗体和抗凝血酶抗体标记的纳米磁珠，捕获凝血酶酶切GST融合蛋白后产生的GST蛋白、未完全酶切的GST融合蛋白以及残余凝血酶蛋白，去除以上杂质，以获得纯净的无GST标签蛋白的目的蛋白，为无GST标签蛋白的目的蛋白的纯化和获取提供一种有效的途径。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种从GST融合蛋白酶切后的产物中纯化无GST标签的目的蛋白的方法和产品。

背景技术

为从GST融合蛋白获得切除GST标签蛋白的目的蛋白，一般通过凝血酶在GST融合蛋白酶切位点进行酶切，然后通过p-氨基琼脂糖或者苯甲脒琼脂糖移除残余凝血酶，再以分子筛层析等方法分离纯化获得纯化的目的蛋白。酶切后的纯化过程往往需要反复测试寻求合适的方法，不同的蛋白分子量及其他性质不同都需要寻求不同的纯化途径来获得纯化的目的蛋白。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从GST融合蛋白酶切后的产物中纯化无GST标签的目的蛋白的方法和产品。

本发明是这样实现的：

第一方面，本发明实施例提供了试剂组合在制备用于从GST融合蛋白酶切后的产物中纯化无GST标签的目的蛋白的产品中的应用，所述试剂组合包括：抗GST抗体、抗凝血酶抗体以及用于偶联抗体的固相载体；所述抗GST抗体和所述抗凝血酶抗体的质量比为(10～150):1。

第二方面，本发明实施例提供了一种从GST融合蛋白酶切后的产物中纯化无GST标签的目的蛋白的产品，其包括如前述实施例所述的试剂组合。

第三方面，本发明实施例提供了一种从GST融合蛋白酶切后的产物中纯化无GST标签的目的蛋白的方法，其包括：将前述实施例所述的试剂组合或前述实施例所述的产品与GST融合蛋白酶切后的产物混合。

本发明具有以下有益效果：

本申请通过使用抗GST单克隆抗体和抗凝血酶抗体标记的纳米磁珠，捕获凝血酶酶切GST融合蛋白后产生的GST蛋白、未完全酶切的GST融合蛋白以及残余凝血酶蛋白，去除以上杂质，以获得纯净的无GST标签蛋白的目的蛋白，为无GST标签蛋白的目的蛋白的纯化和获取提供一种有效的途径。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。

图1为蛋白纯度的凝胶电泳(PAGE)检测；第一泳道为分子量标准；第二泳道为酶切前GST融合蛋白，大小是63KD；第三泳道为GST融合蛋白酶切后反应物；第四泳道为纯化后目的蛋白1(偶联抗体混合磁珠500μL(25mg)加入1mg(1mL)融合蛋白酶切后反应物)；第五泳道为纯化后目的蛋白2(偶联抗体混合磁珠800μL(40mg)加入1mg(1mL)融合蛋白酶切后反应物)；第六泳道为纯化后目的蛋白3(偶联抗体混合磁珠1000μL(50mg)加入1mg(1mL)融合蛋白酶切后反应物)。

具体实施方式

为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。