[发明专利]一种酪蛋白磷酸肽的提取纯化方法在审
申请号: | 202211233483.0 | 申请日: | 2022-10-10 |
公开(公告)号: | CN115594749A | 公开(公告)日: | 2023-01-13 |
发明(设计)人: | 陈炼红;李咪咪;张岩;张兰俊;张诗琦 | 申请(专利权)人: | 西南民族大学 |
主分类号: | C07K14/47 | 分类号: | C07K14/47;C12P21/06;C07K1/18;C07K1/14 |
代理公司: | 北京睿智保诚专利代理事务所(普通合伙) 11732 | 代理人: | 刘晓静 |
地址: | 610041 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 蛋白 磷酸 提取 纯化 方法 | ||
1.一种酪蛋白磷酸肽的提取纯化方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)牦牛乳酪蛋白溶液中加入0.8~1.2%的胰蛋白酶酶解,得到酶解牛乳酪蛋白;
(2)酶解牛乳酪蛋白中依次加入钙离子和乙醇溶液,静置沉淀酪蛋白磷酸肽,得到粗酪蛋白磷酸肽;
(3)粗酪蛋白磷酸肽使用201×7阴离子交换树脂纯化,盐酸洗脱,得到提纯的酪蛋白磷酸肽。
2.如权利要求1所述的提取纯化方法,其特征在于,所述牦牛乳酪蛋白溶液的质量浓度为10~12%。
3.如权利要求2所述的提取纯化方法,其特征在于,所述胰蛋白酶的活力为4000~5000U/g。
4.如权利要求3所述的提取纯化方法,其特征在于,所述酶解的pH为7.5~8.5,所述酶解的温度为50~60℃,所述酶解的时间为2~4h。
5.如权利要求4所述的提取纯化方法,其特征在于,所述钙离子加入后的浓度为1.3~1.7%。
6.如权利要求5所述的提取纯化方法,其特征在于,所述乙醇溶液的体积浓度为55~65%,所述乙醇溶液的添加量为酶解液体积的34~45%。
7.如权利要求6所述的提取纯化方法,其特征在于,所述静置沉淀的时间为5~7h。
8.如权利要求7所述的提取纯化方法,其特征在于,所述201×7阴离子交换树脂纯化时的上样量为90~110mL,流速为2.5~3.5BV/h。
9.如权利要求1~8任一项所述的制备方法,其特征在于,所述盐酸的浓度为0.18~0.22mol/L。
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