[发明专利]一种绵羊毛囊发育标志物miR-23b及其应用

说明书

本发明提供了一种绵羊毛囊发育标志物miR‑23b及其应用，属于生物学技术领域。本发明收集苏博美利奴羊E65、E85、E105和E135胚胎日的胚胎皮肤组织和D7和D30出生后的羔羊的皮肤组织提取RNA进行测序筛选。本发明发现随着胚胎毛囊的发育miR‑23b的表达量逐渐升高，同时，本发明发现通过调节miR‑23b的表达可以调节绵羊真皮成纤维细胞的增殖和细胞中毛囊发育相关基因的表达。

技术领域

本发明属于生物学技术领域，尤其涉及一种绵羊毛囊发育标志物miR-23b及其应用。

背景技术

苏博美利奴是中国自主培育的超细羊毛品种，其平均羊毛纤维直径在17-19 µm，超过了80 Nm 的标准纺织品支数，该品种对细毛羊产业影响深远。羊毛的生长发育受毛囊控制，毛囊是附着在皮肤上的微小器官，具有复杂的形态、复杂的结构和周期性的生长模式。因此，研究毛囊的发育的标志物以及毛囊发育的机制将有助于羊毛产业的发展。

MicroRNA（miRNA）是一类长度约为19-25nt的内源性非编码RNA，广泛参与基因转录后调控活动，具有高度序列保守性、表达时序性和组织特异性。研究表明miRNA参与各种各样的调节途径，包括发育、病毒防御、造血过程、脂肪代谢等，具有重要的基因表达调控作用。目前，关于MicroRNA在毛囊发育中的功能尚不完全清楚，因此本发明对MicroRNA在毛囊发育中的表达情况和功能进行研究。

发明内容

本发明的目的在于提供一种和绵羊毛囊发育相关的标志物miR-23b并且探究miR-23b在毛囊发育中的功能。

为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：

本发明提供了检测miR-23b表达量的引物在制备检测苏博美利奴羊胚胎毛囊发育检测试剂盒中的应用，所述引物的序列如SEQ ID NO.1所示;

所述miR-23b在毛囊发育初期表达量低，所述miR-23b在毛囊发育后期表达量高。

本发明提供了miR-23b抑制剂在制备毛囊发育促进剂中的应用，所述miR-23b抑制剂为miR-23b inhibitor，所述miR-23b inhibitor的序列如SEQ ID NO.6；

所述miR-23b抑制剂促进绵羊真皮成纤维细胞的增殖，毛囊发育相关基因NOTCH1、WNT10A和TGFβ2的表达，加快细胞周期，降低细胞凋亡，促进细胞迁移。

本发明提供了miR-23b抑制剂在制备绵羊真皮成纤维细胞增殖促进剂中的应用，所述miR-23b抑制剂为miR-23b inhibitor，所述miR-23b inhibitor的序列如SEQ ID NO.6所示。

本发明提供了 miR-23b抑制剂在制备绵羊真皮成纤维细胞中毛囊发育相关基因表达促进剂中的应用，所述miR-23b抑制剂为miR-23b inhibitor，所述miR-23b inhibitor的序列如SEQ ID NO.6；

所述毛囊发育相关基因为：NOTCH1、WNT10A和TGFβ2；

所述基因表达促进剂为mRNA表达促进剂和蛋白表达促进剂。

本发明提供了miR-23b抑制剂在制备绵羊真皮成纤维细胞的细胞凋亡抑制剂中的应用，所述miR-23b抑制剂为miR-23b inhibitor，所述miR-23b inhibitor的序列如SEQ IDNO.6。

本发明提供了miR-23b抑制剂在制备绵羊真皮成纤维细胞的细胞迁移促进剂中的应用，所述miR-23b抑制剂为miR-23b inhibitor，所述miR-23b inhibitor的序列如SEQ IDNO.6。

本发明提供了miR-23b促进剂在制备毛囊发育抑制剂中的应用，所述miR-23b促进剂为miR-23b mimic，所述miR-23b mimic的序列如SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示；