[发明专利]一种抗BCMA的纳米抗体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种抗BCMA的纳米抗体(Nb)，其特征在于，包含以下中的任一者：

(1)一种抗BCMA蛋白的纳米抗体，命名为BCMA-Nb381，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；

(2)一种抗BCMA蛋白的纳米抗体，命名为BCMA-Nb388，氨基酸序列如SEQ ID No.2所示；

(3)一种抗BCMA蛋白的纳米抗体，命名为BCMA-Nb394，氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。

2.一种抗BCMA的人源化纳米抗体(huNb)，其特征在于，根据权利要求1中(1)、(2)和(3)所述改造的抗BCMA蛋白的人源化纳米抗体，命名为BCMA-hu381、BCMA-hu388和BCMA-hu394，氨基酸序列如SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。

所述纳米抗体为单价纳米抗体、多价纳米抗体、多特异性抗体和融合型纳米抗体中的至少一种。

3.一种分离的核酸，其特征在于，其编码如权利要求1或2任一项所述的抗BCMA的纳米抗体。

4.一种重组载体，其特征在于，其含有如权利要求3所述的分离的核酸。

5.一种宿主细胞，其特征在于，其含有如权利要求4所述的重组载体。

6.一种抗BCMA的纳米抗体的制备方法，其特征在于，其包括：培养如权利要求5所述的宿主细胞，以获得所述抗BCMA的纳米抗体。

7.一种重组蛋白及其药物组合物，其特征在于，包含权利要求1和2中任一重组蛋白用于相关疾病诊断或与活性剂联合使用，所述活性剂包括免疫检查点相关制剂和/或抗体偶联药和/或双(多)特异性抗体和/或放射性核素和/或激酶抑制剂。

8.一种抗BCMA的嵌合抗原受体CAR，其特征在于，所述嵌合抗原受体CAR包含信号肽、可识别BCMA抗原的抗原识别区、铰链区、跨膜区和信号转导结构域，所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID No.9所示；

所述嵌合抗原受体CAR的抗原识别区包括如权利要求2所述的抗BCMA的人源化纳米抗体hu388；

所述信号肽为CD8α信号肽；

所述铰链区包括CD8；

所述跨膜区包括CD28跨膜域；

所述信号转导结构域包括CD3ζ；

所述信号转导结构域还包括4-1BB胞内区。

9.一种抗BCMA和CD47的双特异性嵌合抗原受体CAR-h31和CAR-h32，其特征在于，所述嵌合抗原受体CAR包含可识别BCMA和CD47抗原的抗原识别区、铰链区、跨膜区和信号转导结构域，所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID No.11和SEQ ID No.12所示；

所述嵌合抗原受体CAR的抗原识别区包括如权利要求2所述的抗BCMA的人源化纳米抗体hu388和CD47天然配体SIRPα胞外V区(SIRPαV)。

10.一种CAR-T细胞，其特征在于，其包括如权利要求8和9所述的嵌合抗原受体；

所述CAR-T细胞包括通用型CAR-T细胞和自体CAR-T细胞中的至少一种。

11.如权利要求1或2所述的抗BCMA的纳米抗体或如权利要求3所述的分离的核酸或如权利要求4所述的重组载体或如权利要求5所述的宿主细胞或如权利要求7所述的重组蛋白及其药物组合物或如权利要求8和9所述的嵌合抗原受体或如权利要求10所述的CAR-T细胞在制备预防或治疗肿瘤的产品中的应用；

所述产品包括：免疫细胞、试剂、试剂盒、药物和药物组合物中的至少一种；

所述肿瘤包括多发性骨髓瘤、急性髓细胞白血病、B细胞淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤中的至少一种；所述实体瘤包括骨肉瘤、结直肠癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌和头颈癌中的至少一种。