[发明专利]高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法

说明书

本发明提出的是一种高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利中异构体的方法，首先配制供试品和异构体对照品的系统适用性溶液，取待测精氨酸培哚普利本品配制供试品溶液和对照溶液；取系统适用性溶液注入液相色谱仪，记录色谱图，系统适应性溶液中异构体和精氨酸培哚普利依次出峰，再精密量取对照溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图。本发明能够有效分离异构体，可有效控制精氨酸培哚普利中的异构体含量，对于成品及制剂的质量控制有着不可或缺的意义。

技术领域

本发明涉及的是一种高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法，属于化学检测分析技术领域。

背景技术

精氨酸培哚普利为第三代血管紧张素转换酶抑制剂，服后6小时降压效果最大，作用持续时间长，培垛普利可扩张大、小动脉，减少血容量，降低系统血管阻力、左室充盈压和肺毛细血管楔压，增加心排血量和每搏输出量，增加心脏指数而不改变心率，提高患者运动耐量，减轻左室心肌肥厚，改善血流动力学。本品耐受性好，不引起高血糖，对血脂亦无不良影响。培哚普利服后对ACE的抑制较其他ACE抑制剂起效慢，对ACE的抑制率达90%以上，服后1小时起效，3～4小时达最大药理效应，维持24小时。

2018年4月28日，复方制剂（FDC）精氨酸培哚普利10mg/氨氯地平5mg（开素达®）正式获国家食品药品监督管理总局（CFDA）批准上市。精氨酸盐的加入使培哚普利的保存稳定性增加了约50%。在疗效方面，培哚普利与氨氯地平机制互补，具有协同发挥降压疗效的优势，是降压治疗的“黄金搭档”。培哚普利/氨氯地平FDC半衰期长达30小时，长效作用可以覆盖全天血压。培哚普利/氨氯地平这一组合的心血管益处已经被ASCOT、EUROPA-CCB等大型临床研究证实，其在降低全因死亡、心血管死亡、总冠脉事件、卒中、新发糖尿病以及肾损伤风险方面均表现出临床优势。

在降压类药物中，异构体的存在是影响药效的一大因素，如氨氯地平在初期使用时为混旋体，后期拆分为药效更强的左旋氨氯地平。精氨酸培哚普利中的异构体也是影响产品质量的重要杂质：中国药典、欧洲药典、美国药典等均将其限度定为0.1%。上述参考标准中的方法均为：用适合的十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（如Inertsil ODS3 ；5μm；25cm×4.6mm）；以乙腈-正戊醇-0.15%庚烷磺酸钠溶液（用35%的高氯酸溶液调节pH至2.0）（217:3:780）为流动相；检测波长215nm；柱温50℃；检测结果如附图5所示。在该条件下，单针的分析时间长达180分钟，且分离效果受试剂影响较大，各种品牌的离子对试剂对于本品原标准色谱条件的分离度、基线情况干扰较大，对于日常检测造成很大的影响。

发明内容

本发明的目的在于解决现有精氨酸培哚普利制备和质量检测过程中存在的上述问题，提出一种高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法，并严格进行方法验证，保证方法的科学严谨，满足研发和生产的需求。

本发明的技术解决方案：高效液相色谱法测定精氨酸培哚普利异构体的方法，具体包括如下步骤：

1）系统适用性溶液的配制：取精氨酸培哚普利及其立体异构体混合对照品适量，用乙醇-水（1:1）的混合溶剂制成每1ml中含精氨酸培哚普利2mg及精氨酸培哚普利立体异构体0.01mg的溶液，作为系统适用性溶液；

2）供试品溶液的配制：取待测精氨酸培哚普利约20mg，用混合溶剂制成每1ml中含2mg精氨酸培哚普利的溶液，作为供试品溶液；

3）对照溶液的配制：精密量取供试品溶液1ml，用混合溶剂制成每1ml中含0.01mg供试品的溶液，作为对照溶液；

4）异构体的液相色谱检测：取系统适用性溶液10μl注入液相色谱仪，立体异构体色谱峰及主峰的相互分离度均大于1.5时，再精密量取对照溶液和供试品溶液各10µl注入液相色谱仪，记录色谱图。