[发明专利]一种利用表面增强拉曼光谱技术无标签监测药物的方法及其应用

说明书

一种利用表面增强拉曼光谱技术无标签监测药物的方法及其应用，本发明涉及一种利用表面增强拉曼光谱技术无标签监测药物的方法及其应用。本发明的目的是为了解决现有药物成分分析方法复杂、耗时长的问题，本发明用柠檬酸钠溶液还原硝酸银生成银溶胶，加入卤化物孵育制备增强基底，将增强基底与待测样品混合，然后加入氯化钙溶液充分混合，再进行SERS检测。本发明在血清中检测小分子药物具有较好的灵敏度和信噪比，还成功监测了小鼠血清中阿霉素分子的代谢水平并检测到人血清中乐果的SERS信号，以及可以对血清中药物进行定量分析，本发明方法具有检测时间短、高灵敏性、高稳定性和重现性的特点。本发明应用于药物监测领域。

技术领域

本发明涉及一种利用表面增强拉曼光谱技术无标签监测药物的方法及其应用。

背景技术

对样品中药物或其代谢产物进行监测分析，从而可以快速的检测样品中的药物含量并了解药物的代谢水平，目前药物监测主要技术为免疫法和色谱法。免疫法中放射免疫法，酶免疫法、荧光免疫法是较常用于血药浓度监测的方法，免疫法操作简单，速度快，但易受基质成分、药物代谢产物和内源性化合物等非目标待测物的干扰。而且不同药物靶点需要特定的结合分子，这严重限制了免疫法的通用性。色谱法中液相色谱串联质谱法(LC-MS)是目前临床实验室TDM检测的金标准，由于LC的高分离能力和MS的高特异性和灵敏度而被广泛使用。但该方法设备成本高、样品制备复杂，并且需要合格且训练有素的人员。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有药物监测方法复杂、耗时长的问题，提供了一种利用表面增强拉曼光谱技术无标签监测药物的方法及其应用。

本发明一种利用表面增强拉曼光谱技术无标签监测药物的方法，按以下步骤进行：一、将硝酸银溶于去离子水中，以1000-2500转/分钟的转速搅拌溶解，得到硝酸银溶液，然后向硝酸银溶液中加入柠檬酸钠溶液，加热至沸腾后停止加热，搅拌冷却至室温，得到银溶胶，再将银溶胶在20℃、5000-10000转/分钟的条件下离心10-30min，然后去上清，得到离心产物，然后将离心产物与浓度为1mM的卤化物溶液在室温下孵育30-180min，得到增强基底；其中向硝酸银溶液中加入柠檬酸钠溶液的方式为直接倒入或滴加，若是滴加到硝酸银溶液中，则滴加速度为8-12滴/秒；柠檬酸钠溶液与硝酸银溶液的体积比为1：(20-40)；离心产物与卤化物溶液的体积比为1：(0.5-2)；

二、将增强基底与待测样品混合，然后加入浓度为10m M的氯化钙溶液，充分混合，再进行SERS检测，其中增强基底、待测样品与氯化钙溶液的体积比为20：(5-15)：(1-3)。

本发明一种利用表面增强拉曼光谱技术无标签监测药物的方法应用于分析血清中药物成分。

本发明一种利用表面增强拉曼光谱技术无标签监测药物的方法应用于监测血清中药物代谢水平。

本发明一种利用表面增强拉曼光谱技术无标签监测药物的方法应用于血清中药物的定量分析。

本发明基于表面增强拉曼光谱(SERS)技术，其增强基底无拉曼信号，得到的信号全部来自样品本身。该方法检测速度快(5min)，成本低。本发明可以检测并区分血清中的不同小分子药物，还可以监测小鼠血清中阿霉素的血药浓度，并对其代谢水平进行评估。