[发明专利]新型冠状病毒核衣壳蛋白的B细胞免疫优势表位肽及其制备方法和应用在审
申请号: | 202211092479.7 | 申请日: | 2022-09-08 |
公开(公告)号: | CN116284267A | 公开(公告)日: | 2023-06-23 |
发明(设计)人: | 吴超;王秦晋;宁洁;翟爱霞;李滨;何涛君;陈盈;张芳;陈星池;叶开接 | 申请(专利权)人: | 中山大学附属第八医院(深圳福田) |
主分类号: | C07K14/165 | 分类号: | C07K14/165;G01N33/569;G01N33/68;A61K39/215;A61P31/14 |
代理公司: | 深圳市创富知识产权代理有限公司 44367 | 代理人: | 梁嘉朗 |
地址: | 518033 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 新型 冠状病毒 核衣壳 蛋白 细胞 免疫 优势 表位肽 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种新型冠状病毒核衣壳蛋白B细胞免疫优势表位肽,其特征在于,所述B细胞免疫优势表位肽是如SEQ ID NO.66所示的IgG和IgM免疫优势表位肽。
2.一种新型冠状病毒核衣壳蛋白的B细胞免疫优势表位肽,其特征在于,所述B细胞免疫优势表位肽是如SEQ ID NO.64所示的IgG免疫亚优势表位肽。
3.一种鉴定权利1或2所述新型冠状病毒核衣壳蛋白的B细胞免疫优势表位肽的方法,其特征在于,具体步骤包括:
步骤1:检测筛选新型冠状病毒核衣壳蛋白特异性IgG和IgM抗体阳性血清样本;
步骤2:通过步移法合成覆盖新型冠状病毒核衣壳蛋白全长的重叠18肽,得到68条短肽;
步骤3:根据相邻8-9条肽合成1个肽库的原则,将步骤2的68条短肽合成8个肽库;
步骤4:利用步骤3的8个肽库结合核衣壳蛋白抗体阳性血清筛选出B细胞应答优势肽库,再将步骤1的阳性血清样本结合获得的优势肽库筛选得到新型冠状病毒核衣壳蛋白的IgG和IgM免疫优势区域,再通过计算覆盖IgG和IgM免疫优势区域的重叠18肽的优势频率从而得到IgG免疫优势核心区域;
步骤5:用步骤4筛选的阳性血清样本结合覆盖IgG和IgM免疫优势区域的重叠短肽筛选得到新型冠状病毒核衣壳蛋白的IgG和IgM免疫优势表位肽或IgG免疫亚优势表位肽。
4.根据权利要求3所述的鉴定新型冠状病毒核衣壳蛋白的B细胞免疫优势表位肽的方法,其特征在于,所述步骤4中IgG和IgM免疫优势区域的氨基酸序列如SEQ ID NO.76所示。
5.根据权利要求3所述的鉴定新型冠状病毒核衣壳蛋白的B细胞免疫优势表位肽的方法,其特征在于,所述步骤4中IgG免疫优势核心区域的氨基酸序列如SEQ ID NO.77所示。
6.根据权利要求3所述的鉴定新型冠状病毒核衣壳蛋白的B细胞免疫优势表位肽的方法,其特征在于,所述步骤2中68条短肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.68所示。
7.根据权利要求3所述的鉴定新型冠状病毒核衣壳蛋白的B细胞免疫优势表位肽的方法,其特征在于,所述步骤3中8个肽库的氨基酸序列如SEQ ID NO.69、SEQ ID NO.70、SEQID NO.71、SEQ ID NO.72、SEQ ID NO.73、SEQ ID NO.74、SEQ ID NO.75、SEQ ID NO.76所示。
8.权利要求1或2所述的新型冠状病毒核衣壳蛋白的B细胞免疫优势表位肽在制备新型冠状病毒疫苗或新型冠状病毒检测抗原中的应用。
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