[发明专利]一种逆转肝星形细胞激活的仿生纳米药物及其应用

权利要求书

1.一种逆转肝星形细胞激活的仿生纳米药物，其特征在于，该仿生纳米药物通过如下步骤制备获得：

（一）制备仿生纳米载体

以血管内皮细胞HUVEC膜制备仿生纳米载体HNPs，

（二）B7-33的修饰改造

将RGD序列与多肽B7-33偶联修饰；

所述多肽B7-33，氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，具体为：VIKLSGRELVRAQIAISGMSTWSKRSL；

修饰改造后的B7-33的氨基酸序列为：VIKLSGRELVRAQIAISGMSTWSKRSL-GG-c(RGDfK)；

（三）装载构建多肽仿生纳米药物

基于受体和配体的亲和性，实现多肽B7-33在仿生纳米载体HNPs上的高效装载，构建获得多肽仿生纳米药物B7-33-HNPs；具体操作而言：

将步骤（二）的修饰改造后的B7-33与步骤（一）制备所得仿生纳米载体HNPs混合孵育，即可制备获得仿生纳米药物B7-33-HNPs。

2.如权利要求1所述逆转肝星形细胞激活的仿生纳米药物，其特征在于，步骤（一）中，所述血管内皮细胞膜，采用细胞膜提取方法制备获得，具体操作为：

（1）梯度离心提取获得细胞膜

收集所培养的血管内皮细胞，用IB-1重悬后，匀浆研磨；

对研磨后的细胞液，4℃、3000g离心5min，留上清；

将上清再4℃、10000g离心10min，留上清；

将上清加到超离管中，补充IB-1后，4℃、10000g离心2h，留沉淀；

所述IB-1为：SB + 0.5%BSA + 0.5mmol EGTA；

所述SB为：225mmol甘露醇 + 75mmol蔗糖+ 30mmol pH=7.4的Tris-HCl；

（2）使用挤出器挤成细胞膜仿生型纳米载体HNPs

将步骤（1）中离心所得血管内皮细胞置于细胞超声破碎仪中，超声功率100w超声处理3min，随后，采用挤出器进行挤出操作：

首先，利用0.8 μm 聚碳酸酯PC 膜，对超声处理后血管内皮细胞进行上下挤出10次；

随后，依次使用0.4 μm和0.1 μm的聚碳酸酯PC膜分别进行上下挤出10次处理；

最后，制备成平均粒径100nm左右的均一性仿生纳米载体HNPs纳米颗粒备用。

3.如权利要求1所述逆转肝星形细胞激活的仿生纳米药物，其特征在于，步骤（三）中，孵育时，质量百分比计，修饰改造后B7-33的比例为1.5%。

4.如权利要求1所述逆转肝星形细胞激活的仿生纳米药物，其特征在于，步骤（三）中，孵育时，4℃孵育过夜。

5.权利要求1~4任一项所述逆转肝星形细胞激活的仿生纳米药物在制备胰腺癌防治药剂中的应用，其特征在于，通过抗纤维化方式用于预防或逆转胰腺癌细胞向肝脏组织的转移。