[发明专利]NK细胞与CD20、CD38、Her2抗体联合应用

权利要求书

1.一种组合物，所述组合物中包含NK细胞和抗体，所述抗体是利妥昔单抗、达雷妥尤单抗或曲妥珠单抗，所述NK细胞是由以下NK细胞的制备方法制备得到的：

1）制备单个核细胞；

2）使用含有8μg/mL的CD137、8μg/mL的CD28、8μg/mL的CD3生理盐水溶液预处理细胞培养容器；

3）将1）接种于2）中，使用含2000IU/mL的IL-2、1000IU/mL的IL-15、100IU/mL的IL-12、5μg/ml的CD137和血浆的培养基进行细胞培养；

4）补充含有3-10%的血浆、2000IU/mL的IL-2、1000IU/mL的IL-15、100IU/mL的IL-12的培养基；

5）补充含有2000IU/mL的IL-2、1000IU/mL的IL-15、50IU/mL的IL-21的培养基。

2.如权利要求1所述组合物，所述培养基的基础培养基是X-Vivo15。

3.如权利要求1所述组合物，所述步骤4）中使用5％的血浆。

4.如权利要求1所述组合物，所述血浆是灭活血浆或人血白蛋白。

5.如权利要求1所述组合物，所述血浆是自体血浆。

6.如权利要求1所述组合物，所述单个核细胞来源于血液、脐血、骨髓。

7.如权利要求6所述组合物，所述血液是外周血。

8.如权利要求1所述组合物，所述单个核细胞是由Ficoll密度梯度离心法方法制备得到的。

9.如权利要求1所述组合物，所述抗体的工作浓度是500μg/mL。

10.如权利要求1所述的组合物，所述组合物还包括药学上可接受的载体、赋形剂、润湿剂、乳化剂或pH缓冲剂。

11.如权利要求10所述的组合物，所述载体包括无菌的水、油、盐水溶液、葡萄糖水溶液或甘油溶液。

12.如权利要求11所述的组合物，所述赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石、氯化钠或脱脂奶粉。

13.权利要求1所述的组合物的制备方法，所述制备方法包括按照权利要求1所述组合物中的NK细胞的制备方法制备NK细胞，并将制备得到的NK细胞与利妥昔单抗、达雷妥尤单抗或曲妥珠单抗混合，并孵育30-60分钟；

所述利妥昔单抗、达雷妥尤单抗或曲妥珠单抗的工作浓度是500μg/mL。

14.权利要求1所述的组合物在制备治疗以下任意一种癌症的药物中的应用：多发性骨髓瘤、淋巴瘤、乳腺癌。

15.如权利要求14所述应用，所述乳腺癌是HER2过表达的乳腺癌。

16.权利要求1中NK细胞在制备促进利妥昔单抗治疗非霍奇金淋巴瘤和慢性淋巴细胞白血病的药效的产品中的应用。

17.权利要求1中NK细胞在制备促进达雷妥尤单抗治疗多发性骨髓瘤的药效的产品中的应用。

18.权利要求1中NK细胞在制备促进曲妥珠单抗治疗乳腺癌的药效的产品中的应用。