[发明专利]一种红托竹荪液体母种的制备方法

说明书

本发明公开了一种红托竹荪液体母种的制备方法，包括以下步骤：将红托竹荪木屑菌种活化后接入活性培养基，培养出红托竹荪平板母种；将平板母种接入试管斜面培养基，培养成斜面菌种；按配方配置液体培养基，将斜面菌种捣碎成0.1~0.2 cm²小菌块接入液体培养基；接种完成后在28℃、黑暗条件下静止培养2天，转至25℃的恒温摇床中，150r/min的转速培养15天，制得红托竹荪液体菌种的母种。本发明缩短生产周期，降低成本，配方简单生长速率快，萌发点多，成分更简单，更易配置和制备，菌丝平均生长速度可达1.13mm/d，平均满袋时间为100天左右，适宜进一步推广使用。

技术领域

本发明属于食用菌栽培技术领域，具体涉及一种红托竹荪液体母种的制备方法。

背景技术

红托竹荪（Phallus rubrovolvatus Zang.Ji et Lio），属于担子菌门、腹菌纲、鬼笔目、鬼笔科、鬼笔属，是一种名贵食用菌，其体态优美，有着“雪裙仙子”、“真菌皇后”、“真菌之花”的美誉之称。子实体主要由菌盖、菌裙、菌柄和菌托组成，富含大量的氨基酸、蛋白质、膳食纤维、多糖等营养成分。可鲜食，亦可干制后食用，菌柄肥厚，菌裙脉粗眼大，久煮不糊，口感清鲜脆嫩、味道鲜美，是一种食药兼用的大型真菌。其中的多糖还具有抗肿瘤、抗氧化、抗衰老、降血糖、抗疲劳等作用，现有技术中的液体菌种培养基配方复杂，导致制备难，生产周期长生长速率慢，萌发点少，成本高。

发明内容

本发明的目的在于克服上述缺点而提供一种缩短生产周期，降低成本，配方简单生长速率快，萌发点多，成分更简单，更易配置和制备的红托竹荪液体母种的制备方法。

本发明的目的及解决其主要技术问题是采用以下技术方案来实现的:

本发明的一种红托竹荪液体母种的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)培养基的前期准备：包括菌种活化与纯化，试管斜面培养基制备，试管平板培养基制备，液体培养基制作，接种摇床培养；

2)菌种活化：将红托竹荪母种从冰箱取出，室温内避光放置2天，利用镊子，夹取母种木屑菌块，直径0.5~0.8cm，置于平板培养基中央，25℃下避光培养15天；

3)斜面菌种制备：利用接种针，挑取活化后的平板菌种块接种于斜面培养基，放置在恒温气候箱，避光条件下25℃培养25~30天，培养至菌丝长满斜面，制成斜面菌种备用；

4)液体培养基制备，根据培养基配方精确称量并配置分装至锥形瓶，在121 ℃和0.15Mpa的条件下持续灭菌30min，待培养基冷却至室温；

5)：取一只长满的斜面菌种，在无菌条件下接种，使气生菌丝一面向上悬浮，在28℃条件下，黑暗静置48 h，然后放入往复式恒温振荡器中，在25℃、150r/min条件下进行摇床培养15天，即可得到红托竹荪液体菌种的母种。

所述步骤1)中试管斜面培养基制备：称取新鲜马铃薯200g切成薄片，加水1000mL，煮沸25 min，冷却后取纱布过滤，得滤液A，称取新鲜无霉变的麦麸200g，米糠50g，玉米粉50g，黄豆粉50g，混合均匀，使用纱布包扎好，然后加水1000mL，煮沸25 min，冷却后取纱布过滤得滤液B，将滤液A和B混合均匀，加入葡萄糖20g、KH₂PO₄2g、MgSO₄1g、琼脂20g，补足水至1000mL，pH自然；配备完成后加热搅拌使琼脂溶解，并趁热将培养基分装至试管中，约占试管的1/4，每支约20mL，塞好棉花塞或橡胶塞，成单数捆扎一起，棉花塞端包扎油皮纸或塑料薄膜，在121℃和0.15Mpa的条件下灭菌30min，待试管冷却至50℃左右，将成捆斜放在斜面板上，斜面长度不超过试管长度的3/4，冷却后即为斜面培养基。