[发明专利]一种耐高温β-甘露聚糖酶ReTMan26及其基因和应用

说明书

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种来源于嗜热芽胞杆菌(TBS2)的耐高温β‑甘露聚糖酶ReTMan26及其基因和应用。所述β‑甘露聚糖酶ReTMan26，其具有如SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。本发明的耐高温β‑甘露聚糖酶通过高密度液体发酵表达后能够达到较高的发酵水平，并具有优良的耐高温性能，在饲料、食品、生物漂白、纺织等工业中显示出良好的应用潜力。

技术领域

本发明涉及基因工程领域，具体地，本发明涉及一种耐高温β-甘露聚糖酶ReTMan26及其基因和应用。

背景技术

甘露聚糖是由β-1,4-甘露糖苷键连接成主链，且在主链上通常还连接有α-1,6-葡萄糖或半乳糖而形成的一种天然高聚物，广泛存在于植物细胞壁及一些豆科植物种籽中。β-甘露聚糖酶(EC3.2.1.78)是一种能降解β-1,4-甘露糖苷键的糖苷水解酶，形成甘露糖和甘露低聚糖。

作为一种重要的工业用酶制剂，β-甘露聚糖酶被广泛应用于动物饲料、食品加工、生物漂白、纺织、可再生能源等领域。

在饲料及养殖行业中，通过添加外源性β-甘露聚糖酶，可以去除甘露聚糖产生的抗营养作用，提高动物对饲料的消化利用率，促进动物胃肠道内消化酶的分泌，改善肠道微生物菌群结构，减少有害菌在动物肠道中的生长或定植，保护肠黏膜的完整性，促进动物生长。在食品工业中，β-甘露聚糖酶可利用魔芋胶、瓜尔胶或槐豆胶等原料生产甘露低聚糖。在生物乙醇生产中，添加β-甘露聚糖酶对植物原材料进行预处理，可以提高乙醇的生产效率及产量。在造纸工业中，β-甘露聚糖酶和木聚糖酶等协同使用，可以用作纸浆生物漂白剂，减少氯的环境污染。在纺织工业中，β-甘露聚糖酶可以降解粗制布料表面的半纤维素胶质，对布料进行抛光、软化，从而取代常规化学品进行脱胶，减少纺织行业对环境的污染。

此外，β-甘露聚糖酶还是油井石油压裂液的优质生物破胶剂，具有效率高、成本低、对地层伤害小等优点。

由于一些应用领域在加工过程中需要进行高温处理，如饲料制粒、可再生能源生产等，这就要求所开发的β-甘露聚糖酶具有良好的耐高温性能，因此，开发一种具有优良耐高温能力的β-甘露聚糖酶就显得非常迫切，具有良好的应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种耐高温β-甘露聚糖酶ReTMan26。

本发明的另一目的是提供编码上述耐高温β-甘露聚糖酶的基因TBS2-Man。

本发明的另一目的是提供一种经密码子优化后的编码上述耐高温β-甘露聚糖酶的基因CoOp。

本发明的另一目的是提供包含编码上述耐高温β-甘露聚糖酶ReTMan26基因TBS2-Man或CoOp的重组载体。

本发明的另一目的是提供包含上述耐高温β-甘露聚糖酶基因TBS2-Man或CoOp的重组菌株。

本发明的另一目的是提供制备上述耐高温β-甘露聚糖酶的方法。

本发明的另一目的是提供上述耐高温β-甘露聚糖酶ReTMan26的应用。

本发明提供了一种耐高温β-甘露聚糖酶ReTMan26，其基因来源于从热泉中分离筛选出的一株产β-甘露聚糖酶的嗜热枯草芽孢杆菌(TBS2)，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示：

该酶蛋白由318个氨基酸组成，分子量为36132Da。

本发明还提供了编码上述β-甘露聚糖酶的基因TBS2-Man，该基因的序列如SEQ IDNO:2所示：