[发明专利]高产丰原素的枯草芽孢杆菌菌株及构建方法在审
| 申请号： | 202210978312.4 | 申请日： | 2022-08-16 |
| 公开（公告）号： | CN115820705A | 公开（公告）日： | 2023-03-21 |
| 发明（设计）人： | 程景胜;高庚荣;丁明珠;元英进 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C12N15/75 | 分类号： | C12N15/75;C12N15/31;C12N15/54;C12N15/52;C12N15/113;C12N1/21;C12P21/02;C12R1/125 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 陆艺 |
| 地址： | 300350 天津市津南区海*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 高产 丰原 枯草 芽孢 杆菌 菌株 构建 方法 | ||
1.一种高产丰原素的枯草芽孢杆菌菌株的构建方法，其特征是包括如下步骤：利用CRISPR/Cas9技术敲除菌株CGF01的srfAB-srfAC基因片段，敲除pksBCDE基因片段，用Pveg启动子替换天然启动子PfenC，得到高产丰原素的枯草芽孢杆菌菌株，命名为CGF04；
所述srfAB-srfAC基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；
所述pksBCDE基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；
所述的Pveg启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；
所述的PfenC启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
2.权利要求1的方法构建的高产丰原素的枯草芽孢杆菌CGF04。
3.权利要求2所述枯草芽孢杆菌发酵生产丰原素的用途。
4.一种高产丰原素的枯草芽孢杆菌菌株的构建方法，其特征是包括如下步骤：对菌株CGF04利用P43启动子过表达乙酰辅酶A羧化酶基因accBC和3-氧酰基-ACP合酶III基因fabHB，得到高产丰原素的枯草芽孢杆菌菌株，命名为CGF16；所述基因accBC由基因accB和基因accC组成；
所述P43启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。
5.权利要求4的方法构建的高产丰原素的枯草芽孢杆菌CGF16。
6.权利要求5所述枯草芽孢杆菌发酵生产丰原素的用途。
7.一种高产丰原素的枯草芽孢杆菌菌株的构建方法，其特征是包括如下步骤：对菌株CGF16，敲除生物膜形成相关基因片段tapA-sipW-tasA，敲除基因片段epsAB和敲除孢子形成相关基因spoIIIE，得到高产丰原素的枯草芽孢杆菌菌株，命名为CGF26；基因片段epsAB由基因epsA和基因epsB组成。
8.权利要求7的方法构建的高产丰原素的枯草芽孢杆菌CGF26。
9.权利要求8所述枯草芽孢杆菌发酵生产丰原素的用途。
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