[发明专利]一种新型冠状病毒抗原检测试剂盒的制备方法

权利要求书

1.一种新型冠状病毒抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：溶剂的制备

溶剂包括活化缓冲液、活化缓冲试剂a、活化缓冲试剂b、偶联缓冲液、洗涤液、微球封闭液、微球保存液、样本处理液、包被缓冲液、微球稀释液和加样垫处理液；

S2：微球标记

S2.1微球活化

S2.1.1取微球悬浮液和活化缓冲液混合，离心，去除上清液，继续加入活化缓冲液，离心，去除上清液，收集微球；

S2.1.2将S2.1.1的微球和活化缓冲液、活化缓冲试剂b、活化缓冲试剂a混合，制得微球混合液，孵育，将孵育后的微球混合液离心，收集微球；

S2.1.3将S2.1.2的微球加入活化缓冲液混合，离心，制得活化微球；

S2.2微球和抗体偶联

S2.2.1将活化微球和偶联缓冲液混合，超声重悬分散，制得活化微球缓冲液；

S2.2.2在离心管中加入N72抗体，使用偶联缓冲液稀释，再加入活化微球缓冲液，混合后孵育，制得抗体偶联后的微球；

S2.3微球的封闭和保存

S2.3.1将抗体偶联后的微球和微球封闭液混合，超声重悬，孵育，制得孵育后的微球；

S2.3.2将S2.3.1孵育后的微球，离心，去除上清液，制得微球；

S2.3.3将S2.3.2制得的微球和洗涤液混合，离心，去除上清液，收集微球；

S2.3.4将S2.3.3制得的微球和微球保存液混合，超声重悬，离心，去除上清液，收集微球，使用微球保存液和微球混合，混旋老化，制得标记后的微球；

S3、包被模板的制备方法

S3.1包被液的制备：将羊抗鼠IgG和包被缓冲液混合制得包被液1；将N54抗体和包被缓冲液混合制得包被液2；

S3.2包被模板：使用划膜喷金仪分别将包被液1和包被液2喷涂于硝酸纤维素膜；

S4、结合垫的制备方法

S4.1将S2制得的标记后的微球使用微球稀释液稀释，超声，制得稀释后的微球；

S4.2使用划膜喷金仪将稀释后的微球喷涂于玻璃纤维膜，干燥，制得结合垫；

S5、组装、分切、内包装和外包装制得成品。

2.如权利要求1所述的新型冠状病毒抗原检测试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤S1所述的溶剂制备方法为：

(1)活化缓冲液：将2-(N-吗啉)乙磺酸一水物加水混合，使用pH值调节剂调节pH值至5.8-6.2，制得活化缓冲液；

(2)活化缓冲试剂a：将1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺与活化缓冲液混合，制得活化缓冲试剂a；

(3)活化缓冲试剂b：将N-羟基琥珀酰亚胺与活化缓冲液混合，制得活化缓冲试剂b；

(4)偶联缓冲液：将4-羟乙基哌嗪乙磺酸加水混合，使用pH值调节剂调节pH值至7.4-7.8，制得偶联缓冲液；

(5)洗涤液：将4-羟乙基哌嗪乙磺酸、氯化钠和吐温-20加水混合，使用pH值调节剂调节pH值至7.4-7.8，制得洗涤液；

(6)微球封闭液：将4-羟乙基哌嗪乙磺酸、牛血清白蛋白和甘氨酸加水混合，使用pH值调节剂调节pH值至7.4-7.8，制得微球封闭液；

(7)微球保存液：将三(羟甲基)氨基甲烷、氯化钠、吐温-20、牛血清白蛋白、海藻糖和防腐剂加水混合，使用pH值调节剂调节pH值至8.4-8.8，制得微球保存液；

(8)样本处理液：将4-羟乙基哌嗪乙磺酸、氯化钠、聚乙二醇辛基苯基醚、牛血清白蛋白和防腐剂加水混合，使用pH值调节剂调节pH值至7.2-7.6，制得样本处理液；

(9)包被缓冲液：将十二水合磷酸氢二钠、氯化钠和海藻糖加水混合，使用pH值调节剂调节pH值至7.2-7.6，制得包被缓冲液；

(10)微球稀释液：将三(羟甲基)氨基甲烷、吐温-20、牛血清白蛋白、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、海藻糖和防腐剂加水混合，使用pH值调节剂调节pH值至8.4-8.8，制得微球稀释液；

(11)加样垫处理液：将十二水合磷酸氢二钠、氯化钠、酪蛋白钠、乙二胺四乙酸二钠和吐温-20加水稀释，使用pH值调节剂调节pH值至7.2-7.6，制得加样垫处理液。