[发明专利]一种可用于低温沉积3D打印的脱细胞基质及其制备方法和应用有效
申请号: | 202210955240.1 | 申请日: | 2022-08-10 |
公开(公告)号: | CN115382023B | 公开(公告)日: | 2023-08-15 |
发明(设计)人: | 陈明学;周一新;郭全义;杨德金;邵宏翊;刘舒云;眭翔;张颂阳 | 申请(专利权)人: | 北京积水潭医院 |
主分类号: | A61L27/56 | 分类号: | A61L27/56;A61L27/36;A61L27/50;B33Y80/00;B33Y70/00;B33Y10/00 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 任晓云 |
地址: | 100096 北京市西*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 低温 沉积 打印 细胞 基质 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种脱细胞基质支架的制备方法,包括如下步骤:以脱细胞基质作为打印墨水采用3D打印机进行打印;打印后将支架进行冷冻升华干燥,然后将支架置于交联剂中进行交联,再次冷冻升华干燥,得到所述脱细胞基质支架;
所述打印的温度为低温;所述低温的温度范围为-10~-80℃;
所述脱细胞基质的制备方法,包括如下步骤:
(1)将动物组织进行脱细胞处理,得到脱细胞基质匀浆;
(2)在所述脱细胞基质匀浆中加入乙酸溶液,搅拌,然后让部分乙酸挥发,得到所述脱细胞基质;
步骤(2)中,所述乙酸溶液的质量百分浓度为20%~100%;
所述乙酸溶液为不断滴加到所述脱细胞基质匀浆中,直至所述脱细胞基质匀浆由乳白色变为透明状为止;
所述搅拌的温度为0~8℃,时间为12~72 h;
所述脱细胞基质的质量百分浓度为5~10%。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述动物组织为软骨组织、半月板组织、骨组织、肌腱、肌肉、韧带和皮肤中的任一种。
3.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:所述动物组织的脱细胞处理方法为物理法、化学法或酶法。
4.根据权利要求1或2所述的制备方法,其特征在于:步骤(2)中,所述乙酸挥发的方法为在抽风机下磁力搅拌挥发乙酸。
5. 根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于:所述冷冻升华干燥的条件如下:真空度100 mTorr,温度-20~-60℃,时间12~72 h;
所述交联剂为包括乙基-二甲基胺-丙基碳化二亚胺和n-羟基琥珀酰亚胺的溶液;
所述交联的温度为0~25℃,时间为12~72 h。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于:所述交联剂的溶剂为乙醇、水、丙酮和氯仿中的至少一种;
所述交联剂中,所述乙基-二甲基胺-丙基碳化二亚胺的浓度为10~100 mmol/L;n-羟基琥珀酰亚胺的浓度为10~100 mmol/L。
7.权利要求1-6中任一项所述的制备方法制备得到的脱细胞基质支架。
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