[发明专利]一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法

权利要求书

1.一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)唐古特铁线莲预处理：唐古特铁线莲叶、唐古特铁线莲花粉碎，用石油醚冷浸，去石油醚部分，获得脱脂后样品；

(2)将步骤(1)所得脱脂后样品，用甲醇-水或乙醇-水进行有机溶剂提取，多次提取合并提取液，获得皂苷提取液；

(3)蒸发浓缩步骤(2)获得的皂苷提取液，利用有机溶剂对皂苷提取液进行萃取，多次萃取后合并萃取液，萃取液浓缩、挥干，获得皂苷粗提物；

(4)利用固相萃取技术对皂苷粗提物进行样品预处理，获得含常春藤皂苷C的组分；

所述固相萃取技术包括：将皂苷粗提物配制成5-100mg/mL的皂苷水溶液，使用30％-60％(v/v)的甲醇活化固相萃取柱，使用乙腈-水或甲醇-水对固相萃取柱进行淋洗，收集相应组分的淋洗液，浓缩烘干获得含常春藤皂苷C的组分，所述固相萃取柱的填料为C18 HC、C18 ME、C18 Ye或C18 HD；

(5)利用液相色谱分离技术对含有常春藤皂苷C的组分进行制备，即得；

液相色谱柱为HC C18，反相C8或Click PN，色谱柱内径为4.6mm-20mm，进样量50-1000μL，流速为1-15mL/min；检测波长200-220nm，柱温20℃-40℃；采用甲醇-水或乙腈-水为流动相，其中甲醇或乙腈为有机相，纯水为水相；洗脱条件为：20-60分钟内，有机相体积浓度由5％-10％提升至75％-95％的梯度洗脱或按照有机相体积浓度20％-70％等度洗脱；对保留时间10-40min主要成分为常春藤皂苷C的馏分进行收集。

2.根据权利要求1所述的一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法，其特征在于：步骤(1)所述唐古特铁线莲与石油醚的体积比为2-5，所述冷浸的时间为12-24h。

3.根据权利要求1所述的一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法，其特征在于：步骤(2)中的提取方法为超声波辅助提取或加热回流提取；所述超声波辅助提取的条件为：提取时间为20-100min，温度20-80℃，脱脂后样品与甲醇-水或乙醇-水的比例为1:10-1:60(m/v)，甲醇-水中甲醇的浓度为40％-90％(v/v)，乙醇-水中乙醇的浓度为40％-90％(v/v)，功率50-100w，提取1-5次；所述加热回流提取的条件为：提取温度40-90℃，脱脂后样品与甲醇-水或乙醇-水的比例为1:20-1:60(m/v)，提取时间为：20-100min，提取1-3次。

4.根据权利要求1所述的一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法，其特征在于：步骤(3)所述有机溶剂为石油醚以及乙酸乙酯、水饱合正丁醇中的一种或两种，萃取1-5次；首先使用石油醚对皂苷提取液进行萃取，萃取后弃石油醚层，再用乙酸乙酯和/或水饱和正丁醇进行萃取，萃取后合并正丁醇层和/或乙酸乙酯层。

5.根据权利要求1所述的一种从唐古特铁线莲中制备常春藤皂苷C的方法，其特征在于：固相萃取淋洗条件为：乙腈-水淋洗时：超纯水1BV×1-5次，乙腈:水＝20-25:75-80 1BV×1-5次，乙腈:水＝30-35:65-701BV×1-5次，乙腈:水＝40-45:55-60 1BV×1-5次，纯乙腈洗脱1BV×1-5次；甲醇-水淋洗时：超纯水1BV×1-5次，甲醇:水＝20-25:75-80 1BV×1-5次，甲醇:水＝30-35:65-70 1BV×1-5次，甲醇:水＝40-45:55-60 1BV×1-5次，甲醇:水＝50-55:45-50 1BV×1-5次，纯甲醇洗脱1BV×1-5次。