[发明专利]牛布鲁氏菌病初筛和确诊一体化抗体检测试纸条

说明书

本发明涉及一种牛布鲁氏菌病初筛和确诊一体化抗体检测试纸条。所述该试纸条由初筛试纸条(试纸条1)和确诊试纸条(试纸条2)组成，均分别由PVC底板、样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫组成。所述初筛试纸条和确诊试纸条的样品垫相连接，连接处设置有加样孔。使用时，取待检血清滴入加样孔，根据初筛试纸条和确诊试纸条呈现的结果，可现场快速对待检样本做出布病阴性、阳性或可疑的判定。

技术领域

本发明涉及一种牛布鲁氏菌病初筛和确诊一体化抗体检测试纸，属生物制品检测技术领域。

背景技术

布鲁氏菌病(简称“布病”)是一种由布鲁氏菌引起的慢性多器官损伤性人畜共患传染病，严重地威胁着人和多种动物的生命健康。本病不但对动物的繁殖和生产性能具有严重危害，更重要的是，人感染布鲁氏菌后往往难以治愈，从而造成严重的公共卫生问题。因此在布鲁氏菌流行的国家，消除布病一直是公共卫生计划中最重要的目标之一。2016年，WHO将布病视为“世界范围内流行最广泛的人畜共患病，但也是最易被人们所忽视的7种重要传染病之一”。

我国是布病高负担国家，根据农业农村部“兽医公报”发布的动物疫情，分析近6年我国牛牛报告新增病例情况：布病每年报告的新增病例占牛牛所有疾病报告病例总数的88.2％，其余8种相对重要的疫病报告新发病例总和只占11.2％。按照国家统计局公布的牛牛养殖规模和中国动物疫病预防控制中心公布的布病阳性率基数，测算2019年我国仅仅因动物布病导致的产仔数减少、产奶量下降和动物利用胎次减少三项损失高达到770亿，2021年三项损失超过830亿元。

人感染布病是由于接触了感染布病的家畜或其制品，我国家畜布病严重流行状况导致人间布病疫情同样十分严重。统计卫健委官方网站报道2021年度我国人间布病新增病例为69767例，创历史最高水平，按照国际认可的实际发病人数是报道病例的10～25倍测算，我国2021年人间实际新增布病的人数达到惊人的69万人～172万人，健康和生产力损失无法计算。

布病对公共卫生和畜牧业生产构成了十分严重威胁，防控布病已刻不容缓。世界布病防控实践反复证实，控制好动物布病是防控人间布病最经济最有效的策略。“检测—淘汰”(“检-淘”)是国际上布病防控的基本策略，其核心要义在于首先要能准确诊断、快捷诊断，实现既快又准。

随着科学技术的进步，动物布病血清学的检测方法不断改进和提高。传统的凝集试验(如：虎红抗原平板凝集试验、试管抗原凝集试验、乳环凝集试验)逐渐被敏感性高、特异性强的ELISA方法、荧光偏振试验(FPA)等新的检测技术所取代。在布鲁氏菌病血清学检验中一致认为补体结合试验(CFT)在特异性上优于其他方法，常被用来对试管凝集试验和虎红平板凝集试验检测为阳性或可疑的病例进行定性检测。补体结合试验一直被认为是最有效的布病诊断方法，但补体结合试验所需要的补体、溶血素等制备困难，试验操作繁琐，难以在临床上普遍使用。

ELISA是一种与CFT效果相当的诊断方法，该方法操作方便，灵敏度高，特异性较好，一次可以完成大量样品的检测，既可以作为筛选试验应用于动物群体检疫，还可以作为确诊试验。ELISA不仅可以应用于血清抗体的检测，还可应用于乳样中抗体的检测。目前，用于检测布病的ELISA方法包括间接ELISA(iELISA)和竞争ELISA(cELISA)两种。其中iELISA主要检测血清中IgG类抗体，检测结果基本等效于CFT方法，可作为布病确诊方法；cELISA方法需要使用布鲁氏菌特异性单抗，竞争血清中布鲁氏菌特异性抗体，因此可以同时检测血清中的IgG和IgM类抗体，由于IgM类抗体指征了急性感染早期(感染尚未明确)，且IgM存在一定的非特异性，因同时检测IgG和IgM的cELISA方法则可以作为临床上布病的初筛方法。上述各种布病检测方法各有其自身的特点，但存在的共同缺陷是以上各种检验都必须在实验室内完成。一般先分离血清，然后按照各种方法的操作程序进行实验室检验。