[发明专利]一种虫螨腈代谢产物四溴吡咯的检测方法

说明书

本发明属于农药检测技术领域，具体涉及一种虫螨腈代谢产物四溴吡咯的检测方法；本发明采用HPLC测定方法对虫螨腈代谢产物四溴吡咯进行检测和分析，使用Hypersil C18为填料的不锈钢柱，甲醇‑0.1％乙酸铵水溶液作为流动相等度洗脱进行组分分离，并通过外标法对该组分进行定量分析。本发明的虫螨腈中的代谢产物四溴吡咯检测方法具有较好的线性关系，该检测方法操作简便，结果可靠，拥有较好的线性关系、精密度和回收率，可作为虫螨腈的代谢产物四溴吡咯的质量控制手段。

技术领域

本发明属于本发明属于农药检测技术领域，具体涉及一种虫螨腈代谢产物四溴吡咯的检测方法。

技术背景

虫螨腈作为美国氰胺公司(现归属巴斯夫公司)于1985年从链霉菌、放线菌等微生物中分离、修饰、合成的吡咯类杀虫、杀螨剂。长期的试验研究以及田间应用结果显示，虫螨腈对鳞翅目、同翅目和鞘翅目等目中的70多种害虫有着很好的防治效果。虫螨腈因其独特的作用机理，对于抗性强且难以防治的老熟幼虫效果显著，主要用于棉铃虫、菜青虫、斜纹夜蛾、苹果红蜘蛛等害虫害螨。截至2020年底，我国批准虫螨腈的登记可食用作物包括黄瓜、姜、节瓜、芥蓝、韭菜、茶叶、大白菜、豆角、甘蓝、大葱、十字花科蔬菜、小白菜、豇豆、柑橘梨、苹果、茄子，且在甘蓝上登记产品的数量占总登记产品数量的70％以上。研究发现虫螨腈共有8个代谢物，目前研究最多的属代谢产物之一的溴代吡咯腈，其是经毒理学评估唯一有毒理学意义的代谢物，因其毒性是虫螨腈的10倍而受到关注，因此将其纳入虫螨腈杂质农残中。然而，在虫螨腈的代谢产物四溴吡咯含量也对农作物产生影响，对虫螨腈农残也有一定影响，其分子结构如下：

四溴吡咯可作用于海洋环境中的微生物而诱导生物的附着和变态(莫嘉豪.南海孔石藻可培养细菌多样性及代谢产物四溴吡咯研究[J].生物资源,2020(4):9.)，因此，需要对虫螨腈中代谢产物四溴吡咯含量进行控制，虽然该文献对四溴吡咯采用了HPLC的分析方法，通过C18色谱柱，水-乙腈作为流动相进行梯度洗脱，且在210nm处进行分析，但其并未对该检测方法进行方法学分析，仅记载了四溴吡咯是否检出的可能性，并未对该检测方法的灵敏度、精确度、回收性进行分析和研究；吴红对溴虫腈的制备过程中间产物溴代吡咯腈的有效成分进行色谱分析，采用甲醇-水＝78:22(v/v)作为流动相，获得的标准偏差≤0.47，变异系数0.36，平均回收率为101.35％(吴红,焦九英,蒋松钰,等.溴代吡咯腈高效液相色谱分析[J].科技信息,2013(9):2)，该方法对于溴代吡咯腈的有效成分分析具有良好的准确度和精密度，但其并未涉及溴虫腈(虫螨腈)与四溴吡咯的分离方法，由于溴虫腈(虫螨腈)和四溴吡咯同属于溴代吡咯化合物，两者的化学结构差异较大，且高效液相色谱是灵敏度非常高的精密仪器，因化合物的极性等理化性质影响分离和检测的精密度和准确度，该文献并不能揭示虫螨腈与四溴吡咯的分离方法以及效果；国外文献也曾报道过发现四溴吡咯对于海洋生物的影响(Sneed J M,Sharp K H,Ritchie K B,et al.The chemicalcue tetrabromopyrrole from a biofilm bacterium induces settlement of multipleCaribbean corals[J].Proceedings of the Royal Society B Biological Sciences,2014,281(1786):130-143；Jan,Tebben,Dianne,et al.Induction of LarvalMetamorphosis of the Coral Acropora millepora by Tetrabromopyrrole Isolatedfrom a Pseudoalteromonas Bacterium[J].Plos One,2011)，并从细菌代谢物中采用萃取、高效液相等方法分离出四溴吡咯，但均不涉及虫螨腈与四溴吡咯的分离效果和检测的灵敏度、精确度等，仅对四溴吡咯的是否检出作出报道。

目前，虫螨腈的标准中未包含有虫螨腈中代谢产物四溴吡咯的检测方法，因此急需一种检测方法更好的分离虫螨腈与四溴吡咯，才能更好的控制农药虫螨腈或农药残留中四溴吡咯的含量。