[发明专利]以NOD样受体家族蛋白3为标志物在制备诊断或监测脓毒症免疫抑制的试剂中的应用

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及以NOD样受体家族蛋白3为标志物在制备诊断或监测脓毒症免疫抑制的试剂中的应用。本发明将外周血单核细胞中NLRC3表达作为生物标志物，制备脓毒症免疫抑制预测的试剂，通过检测外周血单核细胞或组织巨噬细胞的NLRC3的转录水平，表达增加预示脓毒症患者免疫抑制。从而能够给予个体化干预治疗提高脓毒症免疫抑制的救治率，为合理选择治疗手段和分配医疗资源提供参考信息，对提高脓毒症患者预后具有重要临床应用价值。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及以NOD样受体家族蛋白3为标志物在制备诊断或监测脓毒症免疫抑制的试剂中的应用。

背景技术

脓毒症是宿主对感染的免疫失调而导致危及生命的器官功能障碍，一直以来都是重症监护病房内患者死亡的首要原因，当前除了传统的液体复苏、抗感染处理、对症支持疗法外，尚无有效的治疗方法。近年来资料显示，调节免疫功能是改善脓毒症病死率的重要手段，然而，免疫调节介入的时机却是当前最大的难题之一，因此，监测脓毒症免疫功能的变化，是降低脓毒症死亡率的主要途径。当前，脓毒症免疫功能紊乱的核心，其中脓毒症免疫抑制是最主要主要特征。通常认为是免疫抑制状态是在急性炎症反应之后发生。然而，近年来观察到这些状态存在重叠现象或交织存在，即脓毒症发生的过度炎症阶段(即起病的数小时至数日)，抗炎症细胞因子等免疫抑制分子或抑炎因子表达也增加，这为临床有效识别脓毒症免疫抑制的发生带来了极大的挑战。因此，探寻新的标志物仍是脓毒症免疫抑制识别或诊断过程中亟需解决的难题。

NOD样受体家族蛋白3(NLRC3)是一种新发现的由第16号染色体的基因所编码的在进化上高度保守的胞质内模式识别受体，该蛋白高表达于单核/巨噬细胞等免疫细胞，在调控免疫应答中都扮演着重要的角色。研究提示，NLRC3蛋白过表达能降低骨髓巨噬细胞和人源单核细胞(THP-1)的促炎活性，但尚未有报道称NLRC3与脓毒症或和脓毒症免疫抑制存在相关性。

发明内容

有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于NOD样受体家族蛋白3(NLRC3)作为生物标志物在脓毒症免疫抑制诊断或预测的试剂或试剂盒中的应用。

本发明提供了以NLRC3为标志物在制备脓毒症免疫抑制诊断的试剂中的应用。

本发明还提供了以NLRC3为标志物在制备监测脓毒症患者免疫反应能力的试剂中的应用。

本发明研究表明，脓毒症患者单核细胞的NLRC3mRNA水平显著高于非脓毒症患者(P0.01)，且与能反映脓毒症免疫抑制状态的HLA-DR与TNF-α表达成负相关。这说明单核细胞NLRC3可能是脓毒症发生免疫抑制的一个标志物。并且，NLRC3蛋白过表达能降低骨髓巨噬细胞和人源单核细胞(THP-1)的促炎活性。但在急性炎性刺激时，NLRC3表达量却短暂降低，这提示，巨噬细胞NLRC3表达变化可能能反映巨噬细胞免疫能力的状态的改变，有可能是监测脓毒症免疫抑制发生的新型标志物。

在本发明中，所述脓毒症免疫抑制诊断的试剂和/或监测脓毒症患者免疫反应能力的试剂，其包括NLRC3水平检测的试剂。

本发明中，所述NLRC3水平包括核酸转录水平和蛋白表达水平，更具体的，所述NLRC3水平为外周血单核细胞中NLRC3水平和/或组织中巨噬细胞中NLRC3的水平。对核酸转录水平的检测可采用普通PCR法进行，也可采用定量PCR的方法进行，例如，采用qPCR、rt-PCR法或者数字PCR法进行，也可采用恒温扩增的方法进行，例如通过NASBA、RCA、HAD、RPA、LAMP、ERA或者NERA的方法进行，本发明对此不做限定。对蛋白表达水平的检测可以采用ELISA的方式进行，也可以采用western blot、免疫层析法、免疫比浊法等其他本领域熟知的蛋白表达水平的检测方法进行，本发明对此不做限定。

本发明实施例中，所述NLRC3水平检测的试剂包括如下I)～IV)中的至少一种：

I)、NLRC3的检测引物；