[发明专利]一种解磷菌剂及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及微生物制剂领域，具体涉及一种解磷菌剂及其制备方法与应用。解磷菌剂选取铅锌矿区自然生长的植物根际土壤采用蒸馏水浸提获得浸提液；并配置富集培养基和含有浸提液的选择培养基；将根际土壤加入至所述富集培养基进行至少两次富集培养，获得细菌富集液；将细菌富集液进行稀释进行选择培养获得解磷菌落，并将解磷菌落混合进行传代培养，将传代培养后的菌群进行发酵扩培获得解磷菌剂，该菌剂不仅具有良好的解磷效率，还能够在重金属浓度较高的条件下良好生长且发挥解磷功能。

技术领域

本发明涉及微生物制剂领域，具体涉及一种解磷菌剂及其制备方法与应用。

背景技术

磷是植物的必要元素，不仅是植物细胞的重要组成部分，且对植物生长以及植物的抗病性、抗寒性具有较大的影响，因此植物对磷的吸收极大程度上影响了植物的生长状况。

但是，通常现有技术中的复合菌剂重金属耐受程度不高，尤其在高浓度重金属的环境下解磷效率低，无法在高浓度重金属矿区土壤中实现高效解磷的目的。

发明内容

针对现有技术中存在的不足，本发明提供了一种解磷菌剂的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：

选取铅锌矿区自然生长的植物根际土壤进行风干，并按照固液比为1：8-12的质量比加入至蒸馏水中，震荡处理后离心取上清液，并进行灭菌处理获得浸提液；所述铅锌矿区为广东凡口铅锌矿区；

所述震荡处理后离心取上清液，在121℃的条件下灭菌20min后得到的液体获得浸提液；

以蛋白胨、牛肉浸膏、氯化钠和蒸馏水为原料配制并灭菌富集培养基，以所述浸提液、蛋白胨、葡萄糖、磷酸钙、硫酸镁、琼脂和蒸馏水为原料配制并灭菌获得选择培养基；以蛋白胨、葡萄糖、磷酸钙、硫酸镁和蒸馏水为原料配制并灭菌获得传代培养基；

将1-3g所述根际土壤加入至140-160ml所述富集培养基进行两次富集培养，获得细菌富集液，包括：将1-3g所述根际土壤加入至140-160ml所述富集培养基中，在28-32℃转速为100rpm条件下震荡培养20-26h，获得富集混悬液：将8-12ml所述富集混悬液加入至140-160ml所述富集培养基中，在28-32℃转速为100rpm条件下震荡培养20-26h，静置获取富集培养上清液即为细菌富集液；

将所述细菌富集液进行稀释后涂布至所述选择培养基上进行选择培养获得透明圈菌斑，并将所述透明圈菌斑接种至传代培养基上30℃条件下进行传代培养，传代培养完成后的液体即为解磷菌剂。

更进一步地，获取上清液包括：

将所述植物根际土壤风干后加入到蒸馏水中混合，在转速为100-120rpm条件下震荡25-35min后，在4000rom条件下离心8-10min，取上清液，在121℃的条件下灭菌20min后得到的液体即为浸提液。

更进一步地，所述富集培养基中各原料的浓度为：蛋白胨10g/L，牛肉浸膏3g/L，氯化钠5g/L，pH为7.4-7.6。

更进一步地，所述选择培养基中各原料的浓度为：蛋白胨5g/L，葡萄糖10g/L，磷酸钙10g/L，硫酸镁0.5g/L，浸提液40m1/L，琼脂20g/L，pH为7.2。

更进一步地，所述传代培养基中各原料的浓度为：蛋白胨5g/L，葡萄糖10g/L，磷酸钙10g/L，硫酸镁0.5g/L，pH为7.2。

更进一步地，所述选择培养和传代培养的培养条件为28-32℃。

本发明还提供了一种解磷菌剂，所述解磷菌剂按照上述制备方法制备获得。

本发明还提供了上述解磷制剂在在铅锌尾矿矿区土壤修复中的应用

有益效果：