[发明专利]一种苯酞二聚体及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种苯酞二聚体及其制备方法和应用，具体涉及医药技术领域。所述方法包括将川芎须根自然阴干、粉碎，加入乙醇水溶液，渗漉提取，提取液减压浓缩得浸膏；将浸膏加水分散，石油醚反复萃取，合并萃取液，减压回收溶剂得石油醚提取物；取提取物过硅胶柱进行石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱，不同Rf值下，分别收集得Fr.1‑5五个组分；将五部分分别提取，得外消旋混合物(±)‑1及其光学纯体(+)‑1b、(–)‑1a，化合物2和化合物3。抗炎活性可见化合物对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞NO生成均有明显抑制作用，是目前发现的对该模型抑制作用最强的苯酞类化合物。本发明通过对川芎非药用部位须根的研究，进一步丰富了苯酞类成分的化学成分库，为天然抗炎化合物发现奠定基础。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种苯酞二聚体及其制备方法和应用。

背景技术

炎症反应程度影响心血管事件的发生率，是血管病变发生的病理基础。大量研究显示苯酞类成分具有较好的抗炎活性。Z-藁本内酯、洋川芎内酯A和新蛇床内酯等单苯酞能通过抑制多种促炎介质表达，阻碍炎症信号通路传递，发挥抗炎作用。部分苯酞二聚体，如ansaspirolide、gaobennolide A、(–)-6-3'a，7-6'-isowallichilide等能显著抑制LPS诱导RAW264.7巨噬细胞产生NO，EC50小于5μM。

川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)为伞形科多年生草本植物，是天然苯酞类成分的主要来源之一。作为大宗川产道地药材品种之一，2019年四川总产量高达1.9万吨，非药用部位生物量丰富。课题组前期对川芎茎叶进行了系统化学成分研究和药效学评价，从中发现多种结构新颖的具有舒张血管活性的苯酞二聚体。近期又通过UHPLC/Q-OrbitrapMS技术对川芎不同部位甲醇提取物的化学成分进行比较，发现川芎须根中同样含有大量的苯酞二聚体，值得进一步挖掘。

发明内容

为此，本发明提供一种苯酞二聚体及其制备方法和应用，以进一步研究川芎须根中的苯酞二聚体。

本发明对川芎须根进行研究，从中分离得到3个聚合位置为3.3'a，8.6'的苯酞二聚体。其中外消旋混合物(±)-1为一对新的对映体(±)-chuanxiongdiolide R11，简称外消旋体(±)-1，命名为(+)-chuanxiongdiolide R11(1b)，简称光学纯体(+)-1b和(–)-chuanxiongdiolideR11(1a)，简称光学纯体(–)-1a，另2个为已知化合物tokinolide B(2)和ansaspirolide(3)。对外消旋混合物(±)-1及其光学纯体(+)-1b、光学纯体(–)-1a以及化合物2和3进行抗炎活性测试，发现均能显著抑制LPS诱导RAW264.7巨噬细胞产生NO，EC50分别为0.05，0.07，1.19，2.89，0.92μM。外消旋混合物(±)-1中(+)-chuanxiongdiolideR11(1b)和(–)-chuanxiongdiolide R11(1a)，化合物2tokinolide B和化合物3ansaspirolide结构分别如下：

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

根据本发明的第一方面提供一种苯酞二聚体的制备方法，包括：

步骤一，将川芎须根自然阴干后，粉碎，加入乙醇水溶液，渗漉提取，提取液减压浓缩得到浸膏；

步骤二，将浸膏加水分散，用石油醚反复萃取，合并萃取液，减压回收溶剂后得石油醚提取物；

步骤三，取石油醚提取物过硅胶柱进行石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱，不同Rf值下，分别收集得组分Fr.1-5五个组分；

步骤四，组分Fr.4过硅胶柱色谱柱，石油醚/乙酸乙酯梯度洗脱，不同Rf值下，得到组分Fr.4.1～4.6的6个组分；