[发明专利]一种用于大肠杆菌自裂解的裂解模块、系统及其应用

权利要求书

1.一种用于大肠杆菌自裂解的裂解模块，其特征在于，所述裂解模块为SP-lysozyme-SsrA，所述SP为编码信号肽的核苷酸序列，所述SsrA为编码SsrA降解标签的核苷酸序列，所述SsrA降解标签的氨基酸序列为SEQ ID NO：8，所述lysozyme为编码溶菌酶的核苷酸序列，所述lysozyme的核苷酸序列为SEQ ID NO：1，所述SP融合在lysozyme的N-端，所述SsrA融合在lysozyme的C-端。

2.根据权利要求1所述一种用于大肠杆菌自裂解的裂解模块，其特征在于，所述信号肽为Sec途径信号肽、Tat途径信号肽或Sec-Tat双途径信号肽。

3.根据权利要求2所述一种用于大肠杆菌自裂解的裂解模块，其特征在于，所述Sec途径信号肽为PelB或PhoA，所述PelB的氨基酸序列为SEQ ID NO：2，所述PhoA的氨基酸序列为SEQ ID NO：3；所述Tat途径信号肽为TorA或FdoG，所述TorA的氨基酸序列为SEQ ID NO：4，所述FdoG的氨基酸序列为SEQ ID NO：5；所述Sec-Tat双途径信号肽为FhuD或MdoG，所述MdoG的氨基酸序列为SEQ ID NO：6，所述FhuD的氨基酸序列为SEQ ID NO：7。

4.一种用于大肠杆菌自裂解的重组载体，其特征在于，所述重组载体包含权利要求1-3任一项所述裂解模块。

5.根据权利要求4所述一种用于大肠杆菌自裂解的重组载体，其特征在于，所述载体是大肠杆菌表达载体pBAD/His。

6.一种用于大肠杆菌自裂解的系统，其特征在于，所述用于大肠杆菌自裂解的系统包含权利要求4或5的重组载体。

7.根据权利要求6所述一种用于大肠杆菌自裂解的系统，其特征在于，所述用于大肠杆菌自裂解的系统包括PelB-lysozyme-SsrA系统、PhoA-lysozyme-SsrA系统、TorA-lysozyme-SsrA系统、FdoG-lysozyme-SsrA系统、FhuD-lysozyme-SsrA系统或MdoG-lysozyme-SsrA系统。

8.基于权利要求6或7所述一种用于大肠杆菌自裂解的系统的构建方法，其特征在于，将重组载体转化到大肠杆菌中，即得到大肠杆菌自裂解的系统。

9.根据权利要求8所述一种用于大肠杆菌自裂解的系统的构建方法，其特征在于，所述用于大肠杆菌自裂解的系统的表达条件为：

大肠杆菌自裂解的系统表达过程中，添加为终培养液的重量的0.20-0.30％阿拉伯糖和0.4-0.6％Triton X-100，诱导重组载体中的裂解模块表达8-12h。

10.一种如权利要求6或7所述一种用于大肠杆菌自裂解的系统的应用，其特征在于，用于目的蛋白的释放或筛选突变体。