[发明专利]用于检测环孢素A肾毒性相关标志物的检测试剂、试剂盒及其用途

说明书

本发明涉及检测试剂以及包含所述检测试剂的试剂盒，所述检测试剂用于检测分离自个体的样品中包括游离肉碱和甘氨酸的环孢素A肾毒性相关标志物的含量。本发明还涉及所述检测试剂在制备用于在个体中诊断环孢素A肾毒性或预测其风险的产品中的用途。本发明的检测试剂和试剂盒能够以高的灵敏度和特异性诊断环孢素A肾毒性或预测其风险。

技术领域

本发明涉及生物化学检测领域。更具体地说，本发明涉及用于检测环孢素A肾毒性相关标志物的检测试剂、试剂盒及其用途。

背景技术

器官移植挽救了数以万计晚期器官功能衰竭患者的生命。2017年我国实施器官移植手术超过1.6万例，手术量居世界第二。其中，肾脏移植术后1年、3年肾存活率已分别达97.9％和92.65％，居国际前列。目前，我国的器官移植事业正处于由数量规模型发展向高质量和高科技含量提升、由移植大国向移植强国冲刺的历史关键时期。值得注意的是，我国器官移植尚缺乏基础性、原创性并在国际上被认可的技术创新，对临床实践指导能力较弱。

钙调磷酸酶抑制剂(calcineurin inhibitor，CNI)是目前器官移植免疫抑制联合用药中的核心药物。环孢素A(CsA)是一种高效CNI，是目前器官移植的广泛使用的免疫抑制剂。但是由于CsA引起的肾脏损害明显增多，给患者带来了沉重的医疗负担，给国家造成了重大经济损失。临床对CsA致肾损伤的监测，主要依靠影像学和传统的体液生化分析，这些检测方法既缺乏特异性和敏感性，又无法及时指导临床治疗。因此，寻找无创、特异、敏感的生物标志物对移植肾功能的诊断及监测有着重要的意义，对CsA合理、精准的药物治疗有着重大临床实践指导意义。

发明内容

为解决现有技术的不足，发明人通过筛选大量标志物，发现本发明的标志物能够以高的灵敏度和特异性诊断环孢素A肾毒性或预测其风险。基于本发明的标志物，可以有效区分环孢素A肾毒性患者、高风险人群与肾功能正常人群。

更具体而言，本发明提供了2个标志物，并建立所述标志物水平与环孢素A肾毒性关系的诊断模型，该模型具有无创检测、检测安全方便、通量高、检测准确性高的优点，提升了诊断的便利性和标准化程度。

在一方面，本发明涉及检测试剂，其用于检测分离自个体的样品中包括游离肉碱(C0)和甘氨酸的环孢素A肾毒性相关标志物的含量。

在一些实施方案中，所述检测试剂包含适用于液质联用技术的标准曲线储备液和内标储备液。

在一些实施方案中，所述标准曲线储备液包括游离肉碱(C0)溶液和甘氨酸溶液。

在一些实施方案中，所述内标储备液包括C0-D9溶液、和甘氨酸-¹⁵N,¹³C溶液。

在一些实施方案中，所述检测试剂还包含空白基质。

在一些实施方案中，所述空白基质为牛血清白蛋白溶液。

在一些实施方案中，所述样品选自血清、血浆、分离的血细胞或其组合。

在另一方面，本发明涉及试剂盒，其包含如上所述的检测试剂。

在另一方面，本发明还涉及如上所述的检测试剂在制备用于在个体中诊断环孢素A肾毒性或预测其风险的产品中的用途，其中与肾功能正常的对照相比，分离自个体的样品中的一种或多种标志物的含量显著上调和/或下调表明所述个体具有肾毒性或具有肾毒性高风险。

在一些实施方案中，与肾功能正常的对照相比，分离自个体的样品中的游离肉碱(C0)含量显著上调而甘氨酸的含量显著下调表明所述个体具有肾毒性或具有肾毒性高风险。

在一些实施方案中，所述样品选自血清、血浆、分离的血细胞或其组合。