[发明专利]Huc-MSCs及其培养上清液在制备治疗血管内皮损伤药物中的应用

说明书

本发明提供了人脐带间充质干细胞及其培养上清液在制备治疗血管内皮损伤药物中的应用，属于再生医学技术领域，本发明的人脐带间充质干细胞及其培养上清液不仅能够改善血糖水平，还能有效治疗血管内皮损伤，而且脐带组织来源丰富、取材较为容易，因此本发明为Huc‑MSCs治疗糖尿病提供了新的理论依据，并为糖尿病血管内皮损伤的临床治疗提出了一个前瞻性的策略。

技术领域

本发明属于再生医学技术领域，尤其涉及一种Huc-MSCs及其培养上清液在制备治疗血管内皮损伤药物中的应用。

背景技术

内皮损伤是糖尿病患者宏观和微观血管功能障碍的第一步，是糖尿病血管并发症(如动脉粥样硬化、肾病、视网膜病变和神经病变)的高发原因。内皮细胞作为内皮组织中的主要细胞类型，通过释放血管活性因子如前列环素(PGI 2)、活性氧(ROS)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、血管紧张素II(Ang II)等，在调节血管结构和功能方面发挥着至关重要的作用。在长期暴露于高血糖环境后，内皮细胞分泌的血管收缩和炎症因子(如TNF-α、AngII、ROS、ET-1)增多，NO的产生和高密度脂蛋白(HDL)的摄取减少，导致血管系统脆弱，氧化应激增强，内皮修复受损，这是一个促动脉粥样硬化的状态。此外，高血糖严重抑制内皮细胞活力，提高内皮细胞通透性，加速内皮细胞凋亡和衰老。因此，内皮细胞的高血糖损伤是糖尿病血管并发症的病因。目前针对糖尿病血管并发症的药物较少，常用药物如双胍(二甲双胍)、磺脲类、噻唑烷二酮(格列酮)、甲格列酮(格列奈)、α-葡萄糖苷酶抑制剂等，仅以血糖稳态为靶点，间接修复血管损伤。尽管如此，这些药物在临床上仍存在副作用，不能满足糖尿病血管并发症的治疗。因此，需要新方法来恢复糖尿病的血管并发症。

在再生医学领域，间充质干细胞，如人脐带间充质干细胞(Huc-MSCs)在治疗组织损伤方面具有巨大的潜力。MSCs具有归巢和旁分泌的能力，能够迁移到损伤的组织部位，释放细胞外囊泡、生长因子、趋化因子和细胞因子来调节免疫应答和修复损伤的组织。然而，Huc-MSCs是否可用于糖尿病血管损伤的修复尚不清楚。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供了一种Huc-MSCs及其培养上清液在制备治疗血管内皮损伤药物中的应用，Huc-MSCs及其培养上清液对于治疗糖尿病血管内皮损伤有显著疗效。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种人脐带间充质干细胞及其培养上清液在制备治疗血管内皮损伤药物中的应用。

优选地，所述血管内皮损伤包括糖尿病血管内皮损伤。

优选地，所述培养上清液的制备方法，包括如下步骤：

将人脐带间充质干细胞接种于α-MEM培养基中，培养细胞至80％～90％融合度后，更换为DMEM培养基，继续培养40～50h，收集培养基，即得人脐带间充质干细胞的培养上清液。

优选地，所述人脐带间充质干细胞使糖尿病大鼠血清中的VCAM-1和ICAM-1水平恢复到正常水平。

优选地，所述人脐带间充质干细胞显著改善糖尿病大鼠主动脉内皮组织学形态，内膜光滑完整，内皮细胞数量和排列恢复正常水平。

优选地，所述人脐带间充质干细胞的培养上清液使HUVECs活力显著提高、HUVECs迁移能力和HUVECs小管网络形成明显改善、HUVECs创面愈合能力明显恢复。

优选地，所述药物还包括药学上可接受的载体。

相对于现有技术，本发明具有如下有益效果：