[发明专利]一种可降解油酸的基因改造酿酒酵母及其构建方法与应用在审
| 申请号： | 202210743085.7 | 申请日： | 2022-06-28 |
| 公开（公告）号： | CN115058445A | 公开（公告）日： | 2022-09-16 |
| 发明（设计）人： | 曾斌;黄慧 | 申请（专利权）人： | 深圳技术大学 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/66;C12N15/54;C12N1/19;C12R1/865 |
| 代理公司： | 深圳市君胜知识产权代理事务所(普通合伙) 44268 | 代理人： | 徐凯凯 |
| 地址： | 518118 广东省深*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 降解 油酸 基因 改造 酿酒 酵母 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种可降解油酸的基因改造酿酒酵母的构建方法，其特征在于，包括步骤：
获取米曲霉酮酯酰辅酶A硫解酶基因的克隆片段，所述米曲霉酮酯酰辅酶A硫解酶基因记为AoErg10D基因，所述AoErg10D基因的核苷酸序列为SEQ NO.1；
将所述克隆片段连接到载体pYes2.0上，得到AoErg10D表达载体；
将所述AoErg10D表达载体转化至酿酒酵母ScPot1基因突变体Y02319中，构建转基因菌株AoErg10D-Y02319，即得到所述可降解油酸的基因改造酿酒酵母。
2.根据权利要求1所述可降解油酸的基因改造酿酒酵母的构建方法，其特征在于，获取米曲霉酮酯酰辅酶A硫解酶基因的克隆片段的步骤包括：
根据所述AoErg10D基因的核苷酸序列设计对应引物序列，所述引物序列为SEQ NO.13-14；
提取米曲霉总RNA进行反转录，得到米曲霉cDNA；
以所述米曲霉cDNA为模板，所述引物序列SEQ NO.2作为引物，将AoErg10D基因扩增出来，得到米曲霉酮酯酰辅酶A硫解酶基因的克隆片段。
3.根据权利要求1所述可降解油酸的基因改造酿酒酵母的构建方法，其特征在于，将所述克隆片段连接到载体pYes2.0上，得到AoErg10D表达载体的步骤包括：
将载体pYes2.0用限制性内切酶HindIII和EcoRI进行线性化，得到线性化载体；
将所述克隆片段与线性化载体进行重组转化，得到AoErg10D表达载体。
4.一种可降解油酸的基因改造酿酒酵母，其特征在于，采用权利要求1-3任一所述可降解油酸的基因改造酿酒酵母的构建方法制得。
5.一种可降解油酸的基因改造酿酒酵母的应用，其特征在于，将权利要求1-3任一构建方法制得的基因改造酿酒酵母用于降解油酸。
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