[发明专利]一种测定人血浆中抗肿瘤药物酪氨酸激酶抑制血药浓度的试剂盒及测定方法

权利要求书

1.一种测定人血浆中抗肿瘤药物酪氨酸激酶抑制血药浓度的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括对照品母液、洗脱液、提取液和稀释液；

所述对照品母液包括克唑替尼、伊马替尼、阿法替尼、吉非替尼、威罗菲尼、奥希替尼、帕唑帕尼、瑞格菲尼、色瑞替尼、劳拉替尼、达沙替尼、厄洛替尼、埃克替尼、阿帕替尼、阿昔替尼、索拉非尼、伊布替尼和尼洛替尼的储备液；

所述洗脱液包括洗脱液A和洗脱液B，洗脱液A为0.1％甲酸水溶液，洗脱液B为乙腈；

所述提取液为2H₃-瑞格菲尼和帕唑帕尼-¹³C-D₃的甲醇溶液；

所述稀释液包括稀释液A、稀释液B和稀释液C，其中稀释液A为空白血浆、稀释液B为10％甲醇溶液、稀释液C为甲醇。

2.根据权利要求1所述的测定人血浆中抗肿瘤药物酪氨酸激酶抑制血药浓度的试剂盒，其特征在于，所述克唑替尼、伊马替尼、阿法替尼、吉非替尼、威罗菲尼、奥希替尼、帕唑帕尼、瑞格菲尼、色瑞替尼、劳拉替尼、达沙替尼、厄洛替尼、埃克替尼、阿帕替尼、阿昔替尼、索拉非尼、伊布替尼和尼洛替尼的储备液的浓度均为1mg/mL。

3.根据权利要求1所述的测定人血浆中抗肿瘤药物酪氨酸激酶抑制血药浓度的试剂盒，其特征在于，所述提取液中2H₃-瑞格菲尼和帕唑帕尼-¹³C-D₃的浓度均为10ng/mL。

4.根据权利要求1所述的测定人血浆中抗肿瘤药物酪氨酸激酶抑制血药浓度的试剂盒，其特征在于，所示质控液包括浓度分别为25.0、50.0、250.0、1000.0ng/mL的克唑替尼、伊马替尼、阿法替尼、吉非替尼、威罗菲尼、劳拉替尼、奥希替尼的空白血浆溶液；浓度分别为10.0、20.0、100.0、400.0ng/mL帕唑帕尼、瑞格菲尼、色瑞替尼的空白血浆溶液；浓度分别为2.0、4.0、20.0、80.0ng/mL的达沙替尼、厄洛替尼、埃克替尼、阿帕替尼、阿昔替尼、索拉非尼、伊布替尼和尼洛替尼的空白血浆溶液。

5.根据权利要求1所述的测定人血浆中抗肿瘤药物酪氨酸激酶抑制血药浓度的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括质控液，所述质控液为含有小分子酪氨酸激酶抑制剂的空白血浆。

6.一种利用权利要求1-5任一所述的试剂盒测定人血浆中抗肿瘤药物酪氨酸激酶抑制血药浓度的方法，其特征在于，依次按下述步骤进行：

(1)利用提取液预处理人血浆样品，得到待测血浆样品；

(2)利用储备液配置标添样本；

(3)利用标添样本通过液质联用法绘制校正曲线；

(4)将待测血浆样品通过液质连用法得到待测血浆样品中各小分子酪氨酸激酶的抑制峰面积与内标峰面积的比值；

(5)将步骤(4)中得到的比值带入到步骤(3)得到的校正曲线中，计算得到人血浆样品中各小分子酪氨酸激酶的含量。

7.根据权利要求6所述的测定人血浆中抗肿瘤药物酪氨酸激酶抑制血药浓度的方法，其特征在于，步骤(1)中利用提取液预处理人血浆样品的方法为：将100μL血浆置于1.5mL微量离心管中，吸取300μL提取液加入微量离心管内，涡旋10S,以14500r/min离心10min，吸取100μL上清即为待测血浆样品。