[发明专利]一种无花果叶多糖及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种无花果叶多糖，以无花果叶为原料，经过分离纯化后获得的无花果叶中均一单糖组分，其分子量为21967Da，其单糖组成为摩尔比1.91:1.79:2.28:1.00的阿拉伯糖、木糖、葡萄糖与半乳糖。同时公开了该多糖组分产品的制备方法。本发明多糖组分产品具有提高土鸡机体免疫力的作用，可以作为免疫调节剂广泛应用于土鸡饲料添加剂领域。

技术领域

本发明涉及天然成分提取技术，尤其涉及一种无花果叶多糖及其制备方法与应用。

背景技术

无花果(Ficus carica L.)为桑科榕属植物，原产于亚洲西部及地中海地区。多糖是无花果叶中重要的活性成分之一，路蕴等人研究了无花果叶多糖(Polysaccharide fromFicus carica L.leaves,FCLLP)的超声提取工艺及其抗氧化活性，发现FCLLP具有良好的抗氧化活性。王婷婷等人采用超声提取技术协同沸水提取FCLLP，并采用响应面分析法优化了提取工艺，发现FCLLP能有效的降低Ⅱ型糖尿病小鼠空腹血糖及糖耐量水平，改善小鼠体重下降。朱佳琳等人采用微波法提取多糖并确定了FCLLP的微波提取最佳工艺。姜宏伟发现利用超声-微波协同萃取技术提取FCLLP具有时间短，得率高的优势，并且具有较强的抗肿瘤作用。邓佳丽等人发现FCLLP可以诱导人体胃癌细胞SGC-7901 细胞凋亡基因表达，抗凋亡基因和周期基因表达受抑，细胞活性氧上升，抑制细胞增殖，促进细胞凋亡。方华等人申请的专利“一种无花果叶中多糖与总黄酮的提取方法”(申请号：201210389512.2)，该专利涉及一种无花果叶中多糖与总黄酮的综合提取方法。

综上所述，目前对无花果叶多糖的研究主要集中在粗多糖的提取、初步纯化及生物活性，但是对无花果叶多糖单一组分的纯化、结构特性及活性评价研究鲜见报道。无花果叶却随着每年无花果的采摘而被丢弃，造成资源的巨大浪费，因此本发明研究开发一种无花果叶单一多糖组分及其新的用途，对提高无花果叶附加值、开发无花果叶多糖作为一种新的土鸡免疫调节剂具有重要意义。

发明内容

发明目的：针对现有技术的不足与缺陷，本发明提供一种无花果叶多糖及其制备方法，同时公开了该多糖组分产品在提高土鸡机体免疫力功能产品中的应用，可用于土鸡免疫佐剂产品颗粒剂的制备，可以作为免疫调节剂广泛应用于土鸡饲料添加剂领域。

技术方案：本发明的一种无花果叶多糖，其特征在于：以无花果叶为原料，经过分离纯化后获得的无花果叶中均一单糖组分，其分子量为21967Da，其单糖组成为摩尔比1.91:1.79:2.28:1.00的阿拉伯糖、木糖、葡萄糖与半乳糖。

一种无花果叶多糖的制备方法，其特征在于：包括下述步骤：

(1)粗多糖的提取：将无花果叶洗净并粉碎，按照料液比g/mL为1:30-1:10加入水，在50℃-90℃温度下提取30min-100min后离心得上清液；在40℃温度下减压浓缩，向浓缩液加入四倍体积无水乙醇，在4℃温度下静置24h沉淀多糖，10000r/min离心 10min后收集得到沉淀，冷冻干燥沉淀后得到无花果叶粗多糖；

(2)粗多糖的纯化：将粗多糖配制成浓度20mg/mL的溶液，加入Sevag试剂脱蛋白3次后通过透析袋透析24h，透析液冷冻干燥得到无花果叶纯化多糖；

(3)无花果叶多糖组分的分离：将纯化多糖配置成浓度10mg/mL的溶液，上样至DEAE-Sepharose CL-6B离子交换柱，依次用去离子水、浓度为0.1mol/L、0.3mol/L、0.5mol/L、0.7mol/L的NaCl溶液洗脱，洗脱流速为60mL/h，自动收集洗脱液5mL/管，苯酚-硫酸法检测OD₄₉₀后绘制洗脱曲线，选择性收集峰面积最大的主峰对应的洗脱液，即合并0.3mol/L的NaCl溶液所对应的洗脱液，用去离子水对洗脱液透析3次，冷冻干燥得无花果叶多糖组分一次纯化物；