[发明专利]一种线粒体膜囊泡的制备方法在审
申请号: | 202210687000.8 | 申请日: | 2022-06-16 |
公开(公告)号: | CN114908046A | 公开(公告)日: | 2022-08-16 |
发明(设计)人: | 孟婉蓉;李博;李龙江 | 申请(专利权)人: | 四川大学 |
主分类号: | C12N5/077 | 分类号: | C12N5/077 |
代理公司: | 北京深川专利代理事务所(普通合伙) 16058 | 代理人: | 吴晓丹 |
地址: | 610065 四*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 线粒体 膜囊泡 制备 方法 | ||
1.一种线粒体膜囊泡的制备方法,其特征是:具体包括以下步骤:
S1:从小鼠胚胎成纤维细胞系3T3中提取线粒体;
S2:提取线粒体外膜;
S3:将线粒体外膜进行超声处理,然后在聚碳酸酯多孔膜中挤压多次后得到线粒体膜空囊泡;
S4:通过线粒体膜囊泡对CuS进行包裹。
2.根据权利要求1所述的一种线粒体膜囊泡的制备方法,其特征是:所述S1的具体步骤为:
1)从细胞培养皿中移除培养基,用PBS洗涤细胞;
2)洗涤之后,移除PBS,再将细胞刮下,然后将刮下的细胞悬液转移到离心管中,用PBS反复冲洗并将所有细胞收集至离心管内;
3)对离心管内的细胞进行离心处理,沉淀细胞,弃去上清液;
4)将制备的线粒体提取液加入离心管重悬细胞;
5)在冰浴条件下多次研磨细胞;
6)再通过多次离心操作收集管底线粒体。
3.根据权利要求1所述的一种线粒体膜囊泡的制备方法,其特征是:所述S2的具体步骤为:
1)在线粒体内加入超纯水然后进行震荡;
2)在线粒体样品中加入蔗糖溶液;
3)将2)中得到的混合物进行均质处理,接着通过离心收集上清液;
4)再进行离心,使得线粒体外膜沉淀在管底,然后将线粒体外膜进行保存;
5)计算线粒体外膜提取率。
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