[发明专利]干酪乳杆菌HJD及其应用

说明书

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及干酪乳杆菌HJD及其应用，本发明筛选出的菌株干酪乳杆菌HJD对猪霍乱沙门氏菌和大肠埃希菌等肠道指示菌均表现出广谱和较高的抗菌活性。对低pH和0.30％的胆盐均有较好的耐受性，对Caco‑2细胞的粘附性较强，且不携带质粒编码的可转移的抗生素耐药基因。安全性试验显示，HJD株在血平板上不产生α或β溶血；小鼠经口毒性试验中，灌胃后小鼠未出现任何不良反应，同时，灌胃HJD株的小鼠与对照组相比，能显著增加小鼠的增重，由此可见，干酪乳杆菌HJD是潜在的益生菌候选菌株，具有能提高动物生长性能和免疫力的功效。

【技术领域】

本发明涉及微生物技术领域，特别涉及干酪乳杆菌HJD及其应用。

【背景技术】

在养猪业中，抗生素能有效提高饲料转化率，降低临床病死率，但在养殖业中过度和不加选择地使用抗生素作为生长促进剂，增加了人类和动物病原体的抗生素耐药菌株的数量。为此，欧盟和中国分别从2006年1月和2020年1月开始禁止在动物饲料中使用抗生素生长促进剂。因此，迫切需要开发用于动物生产的抗生素替代品。到目前为止，一些潜在的抗生素替代品，如益生菌、有机酸、植物提取物和抗菌肽，已作为饲料添加剂在畜禽生产中被证明有利于动物健康。在这些添加剂中，益生菌被认为是较好的抗生素生长促进剂替代品，因为它们是安全的，可以通过调节宿主肠道微生物的平衡，保持宿主健康。益生菌被定义为活的微生物，当给予足够的剂量时，给宿主带来健康益处。近年来研究表明，益生菌具有抑制病原微生物生长、提高饲料转化率，改善肉品质、增强免疫应答等有益作用。益生菌的作用机制有多种，如产生有机酸、释放抗菌物质、竞争性地排除致病菌、产生消化酶、营养物质和生长因子以及刺激免疫应答等。

乳酸菌(Lactic acid bacteria，LAB)主要通过发酵碳水化合物产生乳酸，包括乳酸杆菌属、肠球菌属、芽孢杆菌属、链球菌属和其他一些微生物。乳酸菌作为益生菌在猪生产中得到了广泛的应用。

虽然对益生菌的研究较多，但目前在猪生产中应用的益生菌种类仍较少，有待开发出更多的益生菌株。此外，益生菌是菌株特异性的，不同菌株具有不同的有益特性和作用。因此，本研究旨在从猪粪便中分离乳酸菌，并对这些菌株进行体外评价，以期在猪生产中作为抗生素替代品。对具有抗菌活性的菌株，进一步评估它们的低酸和胆盐耐受性、Caco-2细胞粘附性、抗生素敏感性和安全性等益生菌特性。

【发明内容】

鉴于上述内容，有必要提供一种具有耐酸、耐胆盐、抑菌性强、抗生素耐药性强的益生菌，拥有这些特性的益生菌具有能很好的在动物体内定植，形成优势菌群，从而改善动物肠道环境、提高动物免疫力的功效。

为达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一株干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)HJD，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC NO：21367，保藏日期为2020年12月14日。

本发明还包括所述干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)HJD在制备抑菌、耐胆盐、耐酸和/或提高动物生长性能相关制剂上的应用。

进一步的，所述抑菌抑制的细菌为：猪霍乱沙门氏菌(SalmonellaCholeraesuis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和/或大肠埃希菌(Escherichia coli)。

进一步的，所述猪霍乱沙门氏菌(Salmonella Choleraesuis)为：猪霍乱沙门氏菌CVCC 2139。

进一步的，所述大肠埃希菌(Escherichia coli)为：大肠埃希菌(O147:K89)CVCC199、大肠埃希菌(O141:K99)CVCC 223、大肠埃希菌(O139)CVCC 1496和/或大肠埃希菌(O157:H7) CICC 21530。

本发明具有如下有益效果：