[发明专利]一种特异性识别新型冠状病毒N蛋白的核酸适配体及其应用

说明书

本发明公开了一种特异性识别新型冠状病毒N蛋白的核酸适配体及其应用。本发明通过筛选得到了可特异性识别新型冠状病毒N蛋白的核酸适配体apt1和apt2，所述核酸适配体不仅可以特异性识别新型冠状病毒N蛋白，且对新型冠状病毒N蛋白的亲和力高，可用于检测新型冠状病毒或制备检测新型冠状病毒的产品。在所述核酸适配体apt1和apt2的基础上，本发明还提供了一种用于检测新型冠状病毒N蛋白的胶体金核酸适配体试纸条、试剂盒和非疾病诊断目的的检测新型冠状病毒的方法，可以快速、简便、准确地检测新型冠状病毒，无需昂贵的实验仪器，适用于更多检测场景。

技术领域

本发明属于病毒检测技术领域。更具体地，涉及一种特异性识别新型冠状病毒N蛋白的核酸适配体及其应用。

背景技术

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是目前发现的第7种β属冠状病毒，具有较高的传染性和隐蔽性，对其进行检测有助于新冠肺炎的预防和治疗，也便于及时采取措施，防止病毒传播扩散。

目前，新型冠状病毒的检测方法主要包括病毒的分离与鉴定、病毒核酸检测以及特异性抗体的检测。病毒分离与鉴定是最传统的检测方法，但是病毒培养时间长、技术要求较高，只适用于三级安全的生物实验室，不适合大批量的快速检测。核酸检测是目前最常规的新型冠状病毒检测方法，又可分为高通量测序、实时荧光定量PCR、等温扩增技术和抗体检测。但高通量测序检测成本较高，检测时间较长；荧光定量PCR技术操作繁琐，对仪器设备要求较高；抗体检测则易受到较多因素干扰。因此，提供一种无需仪器且操作简便快捷的检测新型冠状病毒的产品和方法具有重要意义。

胶体金试纸条是病原体检测方法中使用最广泛的一种，其操作简便、反应时间短，但缺陷是灵敏度不够高，可能存在假阴性。现有技术中虽有关于检测新型冠状病毒N蛋白的适配体胶体金试纸条的报道，但其检测主要依赖的是新型冠状病毒N蛋白单抗，此类抗体在极端条件下的稳定性差，容易失活，若保存不当，用其检测易出现假阴性结果。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有上述技术的缺陷和不足，提供一种特异性识别新型冠状病毒N蛋白的核酸适配体及其应用。

本发明的第一个目的是提供一种特异性识别新型冠状病毒N蛋白的核酸适配体。

本发明的第二个目的是提供所述特异性识别新型冠状病毒N蛋白的核酸适配体在制备新型冠状病毒检测产品或新型冠状病毒药物载体中的应用。

本发明的第三个目的是提供一种用于检测新型冠状病毒N蛋白的胶体金核酸适配体试纸条。

本发明的第四个目的是提供一种非疾病诊断目的的检测新型冠状病毒的方法。

本发明的第五个目的是提供一种检测新型冠状病毒的试剂盒。

本发明上述目的通过以下技术方案实现：

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)包含4种结构蛋白，分别为核衣壳蛋白(N蛋白)、包膜蛋白(E蛋白)、膜蛋白(M蛋白)和刺突蛋白(S蛋白)。其中，N蛋白与病毒基因组RNA相互缠绕形成病毒核衣壳，在病毒RNA的合成过程中发挥着重要的作用。同时，N蛋白相对保守，在病毒的结构蛋白中含量非常丰富，可作为新型冠状病毒的检测标记。在此基础上，本发明筛选得到了一种可特异性识别新型冠状病毒N蛋白的核酸适配体，包括核酸适配体apt1和核酸适配体apt2，核酸适配体apt1的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，核酸适配体apt2的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

本发明所述核酸适配体apt1和apt2不仅可以特异性识别新型冠状病毒N蛋白，且对新型冠状病毒N蛋白的亲和力高，对其进行适当修饰后，可用于检测新型冠状病毒或制备用于检测新型冠状病毒的产品。此外，还可作为新型冠状病毒药物载体，用于治疗新型冠状病毒肺炎。因此，本发明申请保护所述核酸适配体apt1和apt2在制备新型冠状病毒检测产品或新型冠状病毒药物载体中的应用。