[发明专利]一种用于治疗慢性乙型肝炎病毒感染的mRNA药物及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种用于治疗慢性乙型肝炎病毒感染的mRNA药物及其制备方法和应用，所述mRNA药物为脂质纳米颗粒LNP‑IL‑21，其由用于表达IL‑21蛋白或其突变体的IL‑21mRNA和用于递送mRNA的脂质制成，具体为：根据IL‑21基因制备IL‑21mRNA；将IL‑21mRNA与脂质混合，制得LNP‑IL‑21。本发明制备的LNP‑IL‑21脂质纳米颗粒能成功递送至小鼠体内且能在体内表达IL‑21，其通过活化CD8T细胞免疫和体液免疫达到完全清除体内HBV的免疫效果，且在血清中IL‑21为短时表达，具有更好的治疗安全性，一定程度上规避爆发性肝炎发生的可能性，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及mRNA药物技术领域，尤其涉及一种用于治疗慢性乙型肝炎病毒感染的mRNA药物及其制备方法和应用。

背景技术

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染是全球一个公共卫生问题，约有2.5亿人感染慢性乙型肝炎病毒(chronic hepatitis B，CHB)，每年死于CHB相关的疾病的人数高达60万。目前临床上用于治疗CHB的药物主要包括干扰素和核苷酸类似物，但是这些药物不能治愈CHB，因此急需研发新的抗病毒治疗策略。前期研究将白介素21基因(IL-21)克隆至腺相关病毒载体(AAV)，构建AAV-IL-21基因治疗性载体；随后将AAV-IL-21注射入多种慢乙肝小鼠模型中，发现AAV-IL-21可以清除体内HBV，达到彻底治愈CHB的功能。但是上述AAV-IL-21的应用具有较大的局限性，(1)AAV虽然是一种目前临床上可用的基因治疗传输载体，但是AAV具有诱导肿瘤发生、较强免疫原性、诱导外源DNA整合于宿主染色体、长时表达外源基因等危害；(2)该方法在清除HBV过程中主要是通过IL-21活化CD8 T细胞免疫，通过细胞杀伤功能(CTL)发挥作用的，具有较大的治疗风险，如引发爆发性肝炎。综合上述风险因素，急需建立一个基于IL-21的新的更具安全性的治疗方式。

mRNA疫苗主要包含目标基因RNA和传输系统，如纳米脂质颗粒(lipidnanoparticle，LNP)。目前mRNA疫苗已成功运用于如新冠疫苗的研发、基于CAR-T的肿瘤治疗等方面。但在慢性乙型肝炎病毒感染的治疗方面，目前并未涉及mRNA治疗药物的研究。

发明内容

为了克服现有技术中存在的至少一个问题，本发明提供一种用于治疗慢性乙型肝炎病毒感染的mRNA药物及其制备方法和应用，进一步提高慢性乙型肝炎病毒治疗性药物的安全性。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明的第一个方面是提供一种用于治疗慢性乙型肝炎病毒感染的mRNA药物，其包括由IL-21mRNA和脂质制成的脂质纳米颗粒LNP-IL-21；其中，所述IL-21mRNA用于表达IL-21蛋白或其突变体，所述脂质用于递送mRNA。

进一步地，所述IL-21基因为编码IL-21蛋白或其突变体的人源或鼠源基因序列。具体地，所述IL-21基因为人源IL-21基因；或，所述IL-21基因为鼠源IL-21基因；或，所述IL-21基因为用于编码所述人源或鼠源IL-21蛋白突变体的基因序列。

进一步地，所述IL-21基因为GenBank Accession Number：NP_068575.1；具体地，所述IL-21mRNA为人源IL-21mRNA。

进一步地，所述IL-21基因为GenBank Accession Number：NM_021782.2；具体地，所述IL-21mRNA为鼠源IL-21mRNA。