[发明专利]增强内皮细胞通透性的仿生纳米载体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种增强内皮细胞通透性的仿生纳米载体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

制备外泌体：取可表达CD63-VEGF的间充质干细胞株，培养，取含有外泌体的培养液，提纯，得到VEGF工程化外泌体；所述培养采用完全培养基进行培养，所述完全培养基以MEM-a培养基为基底液，并包含FBS、双抗、ITS细胞培养添加物、成纤维细胞生长因子、干细胞生长因子和莫能菌素钠；

制备冰片脂质体：以卵磷脂、胆固醇和冰片为原料制备冰片脂质体；所述卵磷脂、胆固醇和冰片的质量比（18~22）：（4~6）：（1~3）；

融合：将VEGF工程化外泌体和冰片脂质体混合均匀，经数次冷冻和解冻循环，即得仿生纳米载体。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备外泌体步骤中，培养周期为25~35天，培养过程中，当检测到培养液中葡萄糖含量下降至初始完全培养基中葡萄糖含量的一半时更换完全培养基。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述制备冰片脂质体步骤具体为：取卵磷脂、胆固醇和冰片，溶于乙醇中，混合均匀，旋转蒸发除去乙醇，48~52℃水化28~32min，超声分散8~12min，过0.22μm滤膜，得到冰片脂质体。

4.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述融合步骤中，所述VEGF工程化外泌体和冰片脂质体的用量体积比为1：（0.8~1.2），每次冷冻置于液氮中冷冻8~12h，每次解冻置于20~30℃下解冻10~20min。

5.一种采用权利要求1~4任一项所述的制备方法得到的仿生纳米载体。

6.根据权利要求5所述的仿生纳米载体，其特征在于，所述仿生纳米载体的粒径为80~140nm。

7.一种权利要求5或6所述的仿生纳米载体在制备装载核苷酸类药物和/或蛋白质类药物中的应用。

8.一种权利要求5或6所述的仿生纳米载体在制备静脉给药药物中的用途。