[发明专利]一种利用植物-微生物联合修复含砷金尾矿的方法

权利要求书

1.一种利用植物-微生物联合修复含砷金尾矿的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）在砷污染尾矿附近采集土壤，分离纯化得到硫酸盐还原菌株，将300 mL灭菌的改良巴尔斯氏培养基置于500 mL厌氧瓶中，加入5.0 ml过滤灭菌的5%硫酸亚铁铵溶液，按10%接种量筛选得到的硫酸盐还原菌菌液，在厌氧操作箱中，通入纯氮气5分钟后，密封厌氧瓶30℃孵育3-5天，获得富集硫酸盐还原菌；

（2）将1g砷污染尾矿附近土壤加入到10mL CDM培养基中，在30℃条件下放置在厌氧培养箱避光培养72h，每72h取1％的培养液转接到新鲜的CDM培养基中，如此重复3次后，取1mL培养液过0.22μm的滤膜，测定砷的价态和含量，选择具有砷还原能力的菌群作为目标菌群分离纯化，按10%接种量筛选得到的砷还原菌菌液，在厌氧操作箱中，通入纯氮气5分钟后，密封厌氧瓶30℃孵育3-5天，获得富集砷还原菌；

（3）将所述富集硫酸盐还原菌按10%接种量按梯度分别接种至含有不同锑、镉、铅、锌、铜、砷质量浓度即5，10，15，20mg/L新鲜培养基中，pH调至7.0左右，于30℃厌氧培养48h进行耐重金属能力驯化；将砷还原菌按10%接种量按梯度分别接种至含有不同锑、镉、铅、锌、铜、砷质量浓度新鲜培养基中，pH调至7.0左右，于30℃厌氧培养48h进行耐重金属能力驯化；

（4）将白炭黑加入新鲜培养基中，搅拌混合后，再加入驯化后的硫酸盐还原菌和砷还原菌，按1：1搅拌混合，用氢氧化钠调节pH值至7.0左右，30℃厌氧培养3-5天，白炭黑与新鲜培养基体积比为1.0-1.2%，驯化后的硫酸盐还原菌的菌液与新鲜培养基体积比为10%；

（5）在含砷尾矿附近选取长势良好的草本植物，连根带土一并挖起，将所述草本植物与所述各草本植物上的根际土壤分离，分别得到草本植物材料和土壤样品；将所述土壤样品和草本植物材料分别进行预处理，测定所述土壤样品的pH，对所述土壤样品和草本植物材料中砷含量进行测定，并计算所述草本植物材料对砷的迁移率和富集率，根据测定结果，筛选出耐砷性最强的草本植物；

（6）种植所述耐砷性最强的草本植物，7天后，将步骤（4）获得的菌液按0.8-1.0 L/m²剂量喷洒至砷污染矿砂中，进行植物-微生物联合修复；

所述驯化后的硫酸盐还原菌的菌液含量为1×10⁸-1×10⁹ CFU/g。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述草本植物为鬼针草、南艾蒿、蜈蚣草、风车草、藜、苦荬菜、藿香蓟、木芙蓉、砖子苗、大叶醉鱼草、苎麻、灯芯草和飘拂草属。