[发明专利]一种生成带有任意定点修饰的蛋白的方法及定标品在审
| 申请号： | 202210592500.3 | 申请日： | 2022-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN115433752A | 公开（公告）日： | 2022-12-06 |
| 发明（设计）人： | 岳斌;陈韬 | 申请（专利权）人： | 苏州有诺真生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/00 | 分类号： | C12P21/00;C07K1/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 215124 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 生成 带有 任意 定点 修饰 蛋白 方法 定标 | ||
1.一种生成带有任意特定位点修饰的蛋白质的方法，特定位点修饰为M，M周围的连接若干氨基酸为XXX，形成XXX-M-XXX；其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)在蛋白质P的羧基端或氨基端添加酶学识别模块A或a，制得P-A或a-P；
(2)通过多肽合成，使酶学识别模块a或A与XXX-M-XXX反应生成a-XXX-M-XXX或者XXX-M-XXX-A；
(3)通过酶学反应，使用蛋白连接酶催化，在氨基端或羧基端进行连接，使P-A或a-P与a-XXX-M-XXX或XXX-M-XXX-A反应，得到P-A-a-XXX-M-XXX，或XXX-M-XXX-A-a-P；
所述A和所述a为带有特定互补酶识别序列的两个多肽片段。
2.根据权利要求1所述的生成带有任意特定位点修饰的蛋白质的方法，其特征在于，所述A为连接在蛋白质P的羧基端的具有LPEXG模块的蛋白或多肽，所述a为连接在蛋白质P的氨基端上具有GGG的蛋白或多肽。
3.根据权利要求1所述的生成带有任意特定位点修饰的蛋白质的方法，其特征在于，所述步骤(1)的产物P-A或a-P是通过DNA改造，在蛋白质P的羧基端或氨基端添加酶学识别模块A或a制得的。
4.根据权利要求1所述的生成带有任意特定位点修饰的蛋白质的方法，其特征在于，所述步骤(1)的产物P-A或a-P是在蛋白连接酶的催化下合成的。
5.一种定标品，其特征在于，所述定标品是权利要求1-4中任一项所述的P-A-a-XXX-M-XXX，或XXX-M-XXX-A-a-P。
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