[发明专利]一种检测17β-雌二醇的生物传感器与应用在审
申请号: | 202210575125.1 | 申请日: | 2022-05-25 |
公开(公告)号: | CN114908143A | 公开(公告)日: | 2022-08-16 |
发明(设计)人: | 王周平;齐硕;董效泽;段诺 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12Q1/6825 | 分类号: | C12Q1/6825;G01N33/74;G01N33/58;G01N21/64 |
代理公司: | 苏州市中南伟业知识产权代理事务所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 杨慧林 |
地址: | 214000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 17 雌二醇 生物 传感器 应用 | ||
1.一种检测17β-雌二醇的生物传感器,其特征在于,包括劈裂探针STWS-a,STWS-b以及AuNPs@track hairpin,所述AuNPs@track hairpin分散于MgCl2、NaCl和Tween-20混合溶液中;其中,所述劈裂探针STWS-a的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述劈裂探针STWS-b的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,所述分散混合溶液中MgCl2浓度为10-20mM,NaCl浓度为200-600mM和Tween-20浓度为0.02-0.08%(v/v)。
3.根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,所述AuNPs@track hairpin通过以下方法制备得到:
将轨道发夹与TCEP混合并加热,冷却得到稳定的发夹结构,加入AuNPs并混匀得到混合溶液,加入缓冲液使得混合溶液中NaCl的浓度达到0.02-0.07M,之后加入NaCl使得混合溶液中NaCl浓度增加到0.2-0.6M,同时保持tween-20浓度恒定,最终得到所述AuNPs@trackhairpin;所述轨道发夹的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
4.根据权利要求3所述的生物传感器,其特征在于,所述轨道发夹核苷酸序列的5’端或3’端连接功能性基团或分子。
5.根据权利要求3所述的生物传感器,其特征在于,所述功能性基团或分子选自标记荧光素、生物素、氨基、巯基、地高辛、放射性同位素、酶标记或纳米发光材料。
6.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1-5任一项所述的生物传感器。
7.权利要求1-5任一项所述的生物传感器、权利要求6所述的试剂盒在检测17β-雌二醇中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,具体应用方法包括以下步骤:向含有17β-雌二醇待测液中加入所述劈裂探针STWS-a,劈裂探针STWS-b以及AuNPs@track hairpin,搅拌混合反应,检测所得反应液的荧光光谱值,实现17β-雌二醇的定性或定量检测。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述反应条件:反应温度为25-37℃,反应时间1-3h。
10.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述荧光光谱值检测中,激发波长为475-495nm,发射波长为510-700nm。
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