[发明专利]一种皮质醇检测试纸及其制备方法

说明书

本发明涉及一种皮质醇检测试纸及其制备方法。皮质醇检测试纸包括硝酸纤维膜和与硝酸纤维膜连接的标记垫；硝酸纤维膜设置有C线、T线；采用独立C线体系，C线包被羊抗兔抗体，T线包被皮质醇抗原；标记垫喷涂有抗体微球偶联液，所述抗体微球偶联液为偶联皮质醇标记抗体、兔IgG抗体的微球偶联液。本发明具有准确性好、检验时间短、操作简单、只需一步简单操作、不受人员场地等限制、非专业人员可操作、有便携式小仪器、可在非实验室地点操作、适用于哺乳动物等优点。

技术领域

本发明属于检测技术领域，尤其涉及一种皮质醇检测试纸及其制备方法。

背景技术

现在一般使用酶联免疫法试剂测定动物皮质醇。酶联免疫法试剂存在以下缺点：对皮质醇测定工作环境要求高，孵育时间较长且步骤复杂，并需要借助恒温箱等，整个过程耗时长，需要十几小时。需要专业人员操作，检验需要电脑和专门仪器设备，测定成本高。

发明内容

鉴于现有技术所存在的问题，本发明提供一种皮质醇检测试纸及其制备方法，具有准确性好、检验时间短、操作简单、只需一步简单操作、不受人员场地等限制、非专业人员可操作、有便携式小仪器、可在非实验室地点操作等优点。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

本发明提供一种皮质醇检测试纸，包括：硝酸纤维膜和与硝酸纤维膜连接的标记垫；硝酸纤维膜设置有C线、T线；采用独立C线体系，C线包被羊抗兔抗体，T线包被皮质醇抗原；标记垫喷涂有抗体微球偶联液，所述抗体微球偶联液为偶联皮质醇标记抗体、兔IgG抗体的微球偶联液。

采用上述技术方案有益效果包括：

采用上述抗体，可以不受T线位置捕获抗原的竞争影响，采用了独立C线体系，可以使数据更具有真实性而，因为最终模拟曲线是样品浓度和T/C值，如果是常规C线，采用的是标记抗体的二抗，如果样品含目标检测物的浓度很低，那么T线的抗原就会竞争结合更多的标记偶联物，这样流过C线的偶联物就更少，那么进一步导致T/C值更加的拉大而不准确；而采用T/C这种方法，原因是往往个体不同的样品因为基质导致反应强度的变化，含有同样浓度目标检测物的两个不同个体的样本可能测出差距较大的T线吸光度值，同时C线吸光度值相应升高或降低，这时加入T/C算法能屏蔽掉样本误差，从而使检测结果更准确。

本发明提供的检测试纸检验时间短，一般完成检测只需要30min，且检验步骤非常简单，只需一步操作，非专业人员可操作。可以采用便携式小仪器，可在非实验室地点操作。

进一步，皮质醇抗原的使用浓度为1.5mg/mL，皮质醇标记抗体的使用浓度为0.5mg/mL，羊抗兔抗体的使用浓度为1.5mg/mL，兔IgG抗体的使用浓度为1mg/mL。

采用上述技术方案有益效果包括：质醇抗原配液浓度稀释为1.5mg/mL，该浓度是结果梯度筛选出来的最佳浓度，NC膜的包被质醇抗原配液浓度上限一般在3ng/mL左右，超过此浓度将无法固定在膜上，很容易造成假阳性，在竞争法中包被浓度高会导致样本竞争不过T线抗原，灵敏度会降低，包被量过低免疫反应强度也会偏低，检测范围小。

进一步，还包括吸水滤纸、读数窗口、样品垫和支撑物；支撑物位于吸水滤纸、硝酸纤维素膜、标记垫、样品垫的下方；

吸水滤纸的一端与硝酸纤维素膜的一端连接，硝酸纤维素膜的另一端与标记垫的一端连接，标记垫的另一端与样品垫的一端连接；

硝酸纤维素膜设有质控区和检测区，在质控区和检测区处开设有读数窗口，通过读数窗口可以观察位于质控区的C线和位于检测区的T线，在样品垫处开设有加样孔。

标记垫和样品垫的材质都可以采用玻璃纤维，有利于偶联混合物释放。

本发明还提供一种皮质醇检测试纸卡，包括上述皮质醇检测试纸。