[发明专利]一种皮质醇检测试纸及其制备方法

权利要求书

1.一种皮质醇检测试纸，其特征在于，包括硝酸纤维膜和与硝酸纤维膜连接的标记垫；硝酸纤维膜设置有C线、T线；采用独立C线体系，C线包被羊抗兔抗体，T线包被皮质醇抗原；标记垫喷涂有抗体微球偶联液，所述抗体微球偶联液为偶联皮质醇标记抗体、兔IgG抗体的微球偶联液。

2.根据权利要求1所述皮质醇检测试纸，其特征在于，皮质醇抗原的使用浓度为1.5mg/mL，皮质醇标记抗体的使用浓度为0.5mg/mL，羊抗兔抗体的使用浓度为1.5mg/mL，兔IgG抗体的使用浓度为1mg/mL。

3.根据权利要求1或2所述皮质醇检测试纸，其特征在于，还包括吸水滤纸、读数窗口、样品垫和支撑物；支撑物位于吸水滤纸、硝酸纤维素膜、标记垫、样品垫的下方；吸水滤纸的一端与硝酸纤维素膜的一端连接，硝酸纤维素膜的另一端与标记垫的一端连接，标记垫的另一端与样品垫的一端连接；硝酸纤维素膜设有质控区和检测区，在质控区和检测区处开设有读数窗口，通过读数窗口可以观察位于质控区的C线和位于检测区的T线，在样品垫处开设有加样孔。

4.一种皮质醇检测试纸的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)制备抗体微球偶联液，并将抗体微球偶联液喷涂在标记垫；所述抗体微球偶联液为偶联皮质醇标记抗体、兔IgG抗体的微球偶联液；

(2)在T线的位置包被皮质醇抗原，在C线的位置包被羊抗兔抗体。

5.根据权利要求4所述皮质醇检测试纸的制备方法，其特征在于，步骤(1)包括以下步骤：

①将微球清洗后，使用NHS和EDC的混合溶液活化，离心，收集沉淀液；

②使用偶联液将沉淀液与皮质醇抗体偶联，得到皮质醇抗体偶联液；使用偶联液将沉淀液兔IgG抗体偶联，得到兔IgG抗体偶联液；

③终止反应，封闭，将皮质醇抗体偶联液、兔IgG抗体偶联液分别复溶；

④将皮质醇抗体偶联液与兔IgG抗体偶联液混合，得到混合液，将混合液喷涂在标记垫，干燥。

6.根据权利要求5所述皮质醇检测试纸的制备方法，其特征在于，步骤①中，NHS和EDC的混合溶液中，NHS和EDC的质量比为1:1；和/或，步骤②中，使用偶联液将沉淀液与皮质醇抗体偶联，偶联液与皮质醇抗体的体积质量比为100μL：5μg；使用偶联液将沉淀液兔IgG抗体偶联，偶联液与兔IgG抗体的体积质量比为100μL：10μg。

7.根据权利要求5所述皮质醇检测试纸的制备方法，其特征在于，步骤④中，皮质醇抗体偶联液与兔IgG抗体偶联液的体积比为200:24；喷涂的条件为3μL/cm；干燥的条件为37℃烘干2h。

8.根据权利要求4-7任一项所述皮质醇检测试纸的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，皮质醇抗原的使用浓度为1.5mg/mL，羊抗兔抗体的使用浓度为1.5mg/mL，将皮质醇抗原划涂在硝酸纤维素膜形成T线、C线的划涂量为0.8μL/cm；划涂后，37℃烘箱烘干2h。

9.根据权利要求4-7任一项所述皮质醇检测试纸的制备方法，其特征在于，还包括制作样品垫的步骤。

10.一种权利要求1-3任一项所述皮质醇检测试纸的使用方法，包括以下步骤：将待测样品加到样品垫，检测T线OD值和C线OD值，根据关于T线OD值与C线OD值的比值、皮质醇浓度的标准曲线计算待测样品中皮质醇的浓度。