[发明专利]特异性识别左旋咪唑的核酸适配体及其双模式纳米探针和应用

权利要求书

1.一种特异性识别左旋咪唑的核酸适配体，其特征在于：所述核酸适配体的核苷酸序列为SEQ ID NO.1-3所示之一。

2.根据权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于：所述核酸适配体的3′端或5′端修饰有功能基团或分子。

3.根据权利要求2所述的核酸适配体，其特征在于：所述功能基团或分子为同位素、电化学标记物、酶标记物、荧光基团、生物素、亲和配基或巯基。

4.根据权利要求1所述的核酸适配体，其特征在于，所述核酸适配体的筛选方法包括以下步骤：构建初始文库及SEQ ID NO.4-5所示核苷酸序列的引物对，进行亲和力筛选和特异性筛选，得到所述特异性识别左旋咪唑的核酸适配体；

所述初始文库的序列在结构上符合下述通式所示的结构特征：5′-AATCAAACGCTAAGG-N₁₀-GTGCACCCATTCTTG-N₃₀-AAGCTTGGTACCCGTATCGT-3′，其中N代表碱基A、T、C、G中的任一个，N₁₀代表随机片段长度为10个碱基，N₃₀代表随机片段长度为30个碱基。

5.一种基于左旋咪唑适配体的双模式纳米探针，其特征在于：所述双模式纳米探针包括权利要求1-4任一项所述的核酸适配体、互补链和纳米片，所述纳米片为AuNPs/Cu-TCPP(Fe)纳米片或AuNPs/Co-TCPP(Fe)纳米片；

所述核酸适配体通过磁珠进行固定，所述互补链与核酸适配体部分互补，互补链5′端或3′端修饰巯基且通过Au-S共价键与纳米片连接。

6.根据权利要求5所述的双模式纳米探针，其特征在于：所述AuNPs/Cu-TCPP(Fe)纳米片或AuNPs/Co-TCPP(Fe)纳米片由金纳米粒子负载于卟啉金属有机框架Cu-TCPP(Fe)或Co-TCPP(Fe)上得到。

7.根据权利要求5所述的双模式纳米探针，其特征在于：所述核酸适配体通过生物素、亲和素与磁珠连接。

8.根据权利要求5所述的双模式纳米探针，其特征在于：所述互补链的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示。

9.权利要求5-8任一项所述的双模式纳米探针的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将氯金酸与Cu-TCPP(Fe)或Co-TCPP(Fe)混合，在还原剂存在的条件下制备得到所述纳米片；

(2)将巯基修饰的互补链与所述纳米片孵育，得到互补链/纳米片；

(3)将所述互补链/纳米片与磁珠固定的核酸适配体孵育，得到所述双模式纳米探针。

10.权利要求1-4任一项所述的核酸适配体或权利要求5-8任一项所述的双模式纳米探针在检测左旋咪唑中的应用。