[发明专利]一种高纯度淫羊藿黄酮低糖苷组分的制备方法

说明书

本发明涉及一种高纯度淫羊藿黄酮低糖苷组分的制备方法，该方法可用于工业化生产。整个制备流程为：用40‑70％乙醇加热回流提取淫羊藿饮片，减压回收乙醇后，用纯水稀释浓缩液，并采用物理方法去除叶绿素，再用纤维素酶酶解得到淫羊藿低糖苷粗品；随后用低浓度乙醇溶解淫羊藿低糖苷粗品，经过前处理后过NKA‑9、ADS‑17或ADS‑7型大孔树脂吸附，依次用纯水、35‑45％乙醇、55‑65％乙醇、75‑85％乙醇进行洗脱，收集55‑65％和75‑85％乙醇洗脱部位，其中55‑65％洗脱部位经过重新上样洗脱后，合并75‑85％乙醇洗脱部位，减压回收乙醇，干燥后制得淫羊藿低糖苷组分。采用本发明的技术可将淫羊藿黄酮低糖苷组分的纯度从40％提高至65％以上。

技术领域

本发明涉及一种化合物提取方法，具体为一种高纯度淫羊藿黄酮低糖苷组分的制备方法。

背景技术

中药制剂原料的发展可分为三个阶段：其一是以粉碎、煎煮、浸泡为前处理手段的丸、散、膏、丹等第一代中药制剂，具有粗大黑、药物分子混合释放等特点；其二是以中药提取物(粉末、干浸膏、流浸膏)为制剂原料的第二代中药制剂，存在提取粗放、物质基础不明、无序释药和口服用量大等不足；而目前中药制剂正向着第三阶段发展，即以高纯度的组分甚至是单体成分作为原料，研制物质基础明确可控的现代中药剂型。

淫羊藿是临床上常用的中药，具有祛风湿、补肾阳、强筋骨之功效，其中强筋骨对应现代医学中的骨质疏松症。多项研究表明淫羊藿黄酮类组分是其发挥抗骨质疏松作用的药效物质，根据其黄酮母核7位上糖基的数量，淫羊藿黄酮又可分为淫羊藿黄酮多糖苷和淫羊藿黄酮低糖苷，其中淫羊藿黄酮多糖苷主要包括朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷，是淫羊藿饮片中黄酮类组分的主要存在形式；淫羊藿低糖苷则是由淫羊藿多糖苷脱去黄酮母核7位上的糖基形成的次级糖苷，主要由宝藿苷I、宝藿苷II、箭藿苷A、箭藿苷B、鼠李糖基淫羊藿次苷II组成。前期研究表明，体外炮制受热以及体内LPH酶/肠道菌群作用可使淫羊藿饮片中的淫羊藿多糖苷组分转化为对应的淫羊藿低糖苷组分，大鼠在体肠灌流模型及Caco-2细胞模型实验结果表明淫羊藿低糖苷组分有更好的膜渗透性，最后通过去卵巢致骨质疏松大鼠模型和泼尼松龙诱导骨质疏松斑马鱼模型比较二者的药效发现淫羊藿低糖苷组分的体内药效更优，因此我们认为淫羊藿低糖苷组分是吸收入血，发挥药效的主要组分。为了将药物应用于临床，达到防治疾病的目的，我们的研究最终要回归到中药制剂中，所以我们的目的是从淫羊藿饮片中提取分离，并通过体外转换技术得到一定纯度的淫羊藿黄酮低糖苷组分，以此为原料进行中药制剂的研发。

在现有的淫羊藿黄酮低糖苷组分制备的技术方案中，本课题组前期申请了发明专利“一种从淫羊藿提取制备淫羊藿低糖苷组分的方法”(申请号：201910674431.9)，并发表过硕士毕业论文《淫羊藿低糖苷组分的制备技术及工艺工程化研究》，图1是其原制备流程图。该案例在柱纯化分离得到的低糖苷组分包括宝藿苷II、箭藿苷A、箭藿苷B、鼠李糖基淫羊藿次苷II、脱水淫羊藿素-3-O-鼠李糖-二脱氧呋喃糖和宝藿苷I，所得产物采用相对峰面积累加法计算纯度为80％，但是该方法误差较大，使用绝对含量计算其纯度只有40％左右；因中草药成分复杂，该案例柱纯化时常堵塞树脂柱，导致生产无法进行。综上所述，使用上述技术方案制备的淫羊藿黄酮低糖苷组分纯度较低，尚达到不到第三代中药制剂原料的要求，且在工业化生产中难以实施。

发明内容

发明目的：本发明的目的在于提供一种从淫羊藿饮片中制备高纯度淫羊藿黄酮低糖苷组分的方法，并将其应用于工业化生产中，解决现有的技术方案中所制得的淫羊藿黄酮低糖苷组分纯度较低且难以工业化生产的问题，。

技术方案：本发明所述的高纯度淫羊藿黄酮低糖苷组分的制备方法，包括如下步骤：

(1)采用乙醇溶液加热回流提取淫羊藿饮片，减压回收乙醇后，得到浓缩液；

(2)浓缩液用水转溶稀释，并采用物理方法去除转溶液中的叶绿素，得到酶解原液；

(3)酶解原液中加入纤维素酶，搅拌酶解，反应完全得到酶解液；