[发明专利]五谷虫抗菌肽的制备方法、含五谷虫抗菌肽组合物及其制备方法

说明书

本发明公开了一种五谷虫抗菌肽的制备方法、含五谷虫抗菌肽组合物及其制备方法，五谷虫抗菌肽的制备方法包括以下步骤：步骤A，取五谷虫虫卵，饲养至五谷虫要开始化蛹前，收集五谷虫活体，饲养的饲料至少有罗汉果籽；步骤B，清洗五谷虫活体，剪碎，调整温度为5‑15℃后，将五谷虫活体和生理盐水混合，榨汁、离心，水浴加热、离心，得五谷虫粗提取液；步骤C，取五谷虫粗提取液，加水和葡萄糖混匀，灭菌，接种米霉菌孢子进行培养，3‑4天后，离心得五谷虫上清液，灭菌，离心，浓缩后，得五谷虫抗菌肽提取液。相对于市售同类产品，本申请制备的五谷虫抗菌肽的抗菌和抗炎效果明显增强。

技术领域

本发明涉及五谷虫提取的技术领域，尤其是涉及一种五谷虫抗菌肽的制备方法、含五谷虫抗菌肽组合物及其制备方法。

背景技术

近年来，由于抗生素的滥用，细菌的耐药情况日渐严重，使得临床上反复感染的慢性溃疡创面治疗十分困难。五谷虫，又名蛆虫，是泛指丽蝇科丝光绿蝇、大头金蝇或其它近缘昆虫的幼虫，因其抗菌且不易产生耐药性的特性，逐渐引起人们的关注。

目前，市售的五谷虫抗菌肽提取液基本都是用蝇蛆干燥后虫体提取物，虽表现出一定的抗菌性，但其抗菌效果一般，仍有改善的空间。

发明内容

为了进一步提高五谷虫抗菌肽的抗菌效果，本申请提供一种五谷虫抗菌肽的制备方法、含五谷虫抗菌肽组合物及其制备方法。

一种五谷虫抗菌肽的制备方法，包括以下步骤：

步骤A，取五谷虫虫卵，饲养至五谷虫开始发黄，要开始化蛹前，收集五谷虫活体，饲养的饲料中至少有罗汉果籽；

步骤B，清洗五谷虫活体后，剪碎，调整温度为5-15℃后，将五谷虫活体和生理盐水混合之后榨汁、离心，接着95-100℃水浴加热上清液10-15min后再次离心，得到五谷虫粗提取液；步骤C，取五谷虫粗提取物，与水按照体积比1：0.2-1混合均匀后，按照混合液的体积与葡萄糖质量为100mL:3-5g的比例加入葡萄糖，进行灭菌处理，之后接种占混合液体积7-15％的米霉菌孢子培养3-4天，离心，得到五谷虫上清液，灭菌、离心、浓缩，得到五谷虫抗菌肽提取液。

常规饲养的五谷虫一般以麸皮、谷壳作为饲料，本申请采用至少有罗汉果籽的饲料对五谷虫虫卵进行饲养，发现添加有罗汉果籽的饲料饲养的五谷虫抗菌肽的抗炎效果和抗菌效果相对于普通饲料的五谷虫抗菌肽明显提高，结合采用活体成虫低温榨取，除杂和发酵处理的特殊制备方法，相对于目前经常采用烘干法制备的五谷虫提取物，上述方案能在最大程度上减少五谷虫中杂质对五谷虫抗菌肽抗菌和抗炎效果的影响，使得五谷虫抗菌肽抗菌和抗炎效果增强。

并且，本申请制备的五谷虫抗菌肽还同样具有促进烫伤愈合和细胞修复，提高皮肤抵抗外部环境带来的刺激，降低皮肤红肿程度等优点。

优选的，所述饲料由罗汉果籽、奶粉和蔗糖按照质量比为1:0.2-0.5:0.05-0.2组成。

通过罗汉果籽、奶粉和蔗糖按照上述比例搭配的饲料，不但对于增强五谷虫抗菌肽的抗菌和抗炎效果均较佳，而且五谷虫幼虫的成虫率高，死亡率低，有利于获得五谷虫活体。

优选的，所述步骤B中，在0-4℃下，将五谷虫活体于生理盐水中浸泡4-5小时，使其体内代谢物排泄干净，接着依次用甲醛生理盐水溶液、乙醇和馏水洗净五谷虫活体。

通过上述低温浸泡处理，结合用甲醛生理盐水和乙醇冲洗对五谷虫活体进行消毒，接着通过蒸馏水洗去五谷虫活体表面的残留的试剂，减少外界杂质引入五谷虫活体的后续处理步骤，对五谷虫抗菌肽的造成污染，影响五谷虫抗菌肽抗菌效果的发挥。

优选的，所述步骤B中，所述五谷虫活体和生理盐水的体积比1：0.2-1混合。

优选的，所述步骤C中，所述米霉菌孢子在温度为25-35℃，湿度50-70％，pH4.6-7环境下培养。