[发明专利]从果蔬中提取β-烟酰胺单核苷酸的方法及其纯化方法

说明书

本发明涉及食药应用技术领域，具体公开了一种从果蔬中提取β‑烟酰胺单核苷酸的方法及其纯化方法，包括以下步骤，(a)取新鲜果蔬进行预处理；(b)将预处理后的果蔬粉末置于离心容器中，在离心容器中加水搅拌；(c)使用酸性溶液调节步骤(b)搅拌后溶液的pH至酸性；(d)将步骤(c)中的酸性溶液水浴并加酶处理；(e)待酶处理完成后加入适量乙醇溶液搅拌；(f)将步骤(e)溶液中的酶灭活；(g)使用碱性溶液调节步骤(f)灭酶后溶液的pH至碱性；(h)对步骤(g)中的碱性溶液超声萃取，所得萃取物即为β‑烟酰胺单核苷酸粗品；对步骤(h)中的萃取液进行超滤。本发明具有方便性较好、实用性较好和提取效率较高的特点。

技术领域

本发明涉及食药应用技术领域，特别涉及一种从果蔬中提取β-烟酰胺单核苷酸的方法及其纯化方法。

背景技术

随着人们对身体健康的日益重视和对美好生活的追求，有利于身体健康的产品便被受到不断的重视和青睐。2013年以来，哈佛大学的科学研究团队发现了一种名为“β-烟酰胺单核苷酸(NMN)”的奇妙物质，经过一系列的研究实验被宣称能够有效延长小白鼠的寿命。同年，哈佛大学哈佛医学院教授大卫·辛克莱尔(David.Sinclair)在国际顶级学术期刊《细胞》上发表论文，证实并补充了NMN的确能在一定的条件下逆转小鼠线粒体功能和肌肉功能相关的关键生化指标的证据。2016年，代谢领域研究最有影响的刊物《CellMetabolism》报道了给实验鼠补充饲喂NMN可有效地减轻小鼠与年龄相关的生理衰退。在没有任何明显毒性或有害影响的条件下，NMN能够有效地抑制与年龄相关的体重增加和机体衰退，并且能够明显地增强能量代谢，促进机体的体力活动，改善胰岛素的敏感性和血脂水平，对眼功能和其它病理性疾病也有显著的改善。这些研究报道足够证明了NMN在抗衰老方面的巨大潜力，从而被人们逐渐认知和接受。

β-烟酰胺单核苷作为哺乳动物体内烟酰胺腺嘌呤二核苷补救和合成途径的中间体物质由近几年的研究所发现，被证实能够修复脑损伤、保护心脏免于缺血再灌注损伤、改善胰岛功能及修复脑线粒体呼吸缺陷等一系列生理问题，对老年退行性疾病、视网膜退行性疾病、2型糖尿病及脑出血等也具有一定的治疗作用。β-烟酰胺单核苷酸还可以改善缺血性脑损伤和帕金森病、退行性疾病和肥胖。所以对于NMN的开发利用在现阶段高压力的社会环境中是十分需要的。

现阶段对于烟酰胺单核苷酸的获取方法有化学合成法和生物合成法，其中以化学合成的研究起始较早。1981年，Mikhailopulo等人就开始进行NMN的化学合成试验，主要以烟酰胺、三苯甲酰基-β-D-核糖和四乙酰核糖等为原料，通过糖基化、磷酸化和氨解等关键步骤合成。化学合成路线的缺点是：个别原料不仅价格昂贵，获得困难，还存在路程长、分离困难、成本高、异构体分离、多种溶媒和环保投入大等一种或多种缺点，因此严重地制约了NMN的大规模生产及其功效的应用。

β-烟酰胺单核苷酸的生物合成法有酶法和生物发酵法两种。其中由于发酵法自身的原因，发酵产物易被菌体自身所消耗利用，大批量的积累非常困难，生产效率低，所以其工业化生产难以实现。

发明内容

本发明为了解决现有β-烟酰胺单核苷酸在利用过程中所存在的上述技术问题，提供了一种从果蔬中提取β-烟酰胺单核苷酸的方法及其纯化方法，它具有方便性较好、实用性较好和提取效率较高的特点。

本发明的技术方案：从新鲜果蔬中提取β-烟酰胺单核苷酸的方法，包括以下步骤，

(a)取新鲜果蔬进行预处理；

(b)将预处理后的果蔬粉末置于离心容器中，在离心容器中加水搅拌；

(c)使用酸性溶液调节步骤(b)搅拌后溶液的pH至酸性；

(d)将步骤(c)中的酸性溶液水浴并加酶处理；

(e)待酶处理完成后加入适量乙醇溶液搅拌；

(f)将步骤(e)溶液中的酶灭活；